文章-世纪中文出版社

miR-145靶向Glut1调节Akt通路对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响下载：40 浏览：222

王敬1 邢惠海2 徐书方3 白雪3 荆娇3 贾丽丽3 张玉清3 《肿瘤研究》 2020年12期

摘要:

[目的]探讨微小RNA-145(miR-145)对葡萄糖转运蛋白1(Glut1)表达和丝苏氨酸激酶(Akt)信号通路的调节作用，以及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。[方法] 2018年2月至2019年2月20例乳腺癌样本及其癌旁组织样本进行Glut1的免疫组化染色，同时采用荧光定量PCR对组织样本中Glut1和miR-145基因表达水平进行检测。采用蛋白免疫印迹实验检测不同乳腺癌细胞株中Glut1蛋白的表达，选择Glut1表达量较高的MDA-MB-231细胞用于后续实验。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-145对Glut1的转录调控，采用磺酰罗丹明B(SRB)实验和细胞迁移侵袭(Transwell)实验验证miR-145对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，采用Western blot实验验证Akt信号通路蛋白的表达。[结果]与癌旁组织相比，乳腺癌组织中Glut1蛋白和基因表达明显提高(t=7.230，P=0.002)，而乳腺癌组织中miR-145表达明显下降(t=4.246，P=0.013)。乳腺癌细胞中转染miR-145后Glut1表达明显下降(t=7.664，P=0.002)，并且miR-145对Glut1基因转录具有一定抑制作用，并且抑制效应依赖于Glut1基因的3′-UTR区域。乳腺癌细胞中转染miR-145后细胞在3d和4d的增殖能力(t=7.746和8.086，P=0.001和0.001)以及迁移能力明显下降(t=4.960，P=0.008)，并且Akt蛋白的磷酸化水平明显下降(t=5.406，P=0.006)。[结论]在乳腺癌中Glut1表达和Akt信号通路的活化能够被miR-145所抑制，并且miR-145能够抑制乳腺癌细胞增殖和迁移。

MicroRNA在肺癌耐药中的作用下载：53 浏览：222

姜安祺张明辉张锐王艳《肿瘤研究》 2020年11期

摘要:

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类短链、非编码小分子RNA，不同癌症治疗中特异性miRNAs失调参与了肿瘤细胞耐药的过程，进而调节肿瘤细胞对治疗的敏感性。研究表明miRNAs参与肺癌化疗及靶向的耐药过程。miRNAs具有克服肺癌耐药的潜能，同时能够增加肺癌细胞对化疗及靶向治疗的敏感性。全文综述了现阶段肺癌治疗中miRNAs在化疗药物及靶向药物耐药机制中的作用。

外泌体miRNA作为肿瘤标志物在消化系肿瘤的研究进展下载：42 浏览：241

王艳红于景翠《肿瘤研究》 2020年8期

摘要:

外泌体是由活细胞分泌，普遍存在于唾液、血浆和乳汁等体液中的纳米级囊泡。外泌体中含有诸多功能性的DNA、蛋白质以及非编码RNA等活性物质，外泌体可以在细胞间穿梭广泛参与细胞间信息传递和物质交换。研究发现肿瘤外泌体中一些特定miRNA具有生物学特性和靶向特异性，可以调节机体在代谢紊乱中的生物活动，从多方面参与肿瘤发生发展，具有成为肿瘤治疗和预后标志物的潜力。因此，探寻外泌体中特定miRNA在消化系统肿瘤中的作用及其作为生物标志物的可能性，从而为消化系统肿瘤的预防和诊疗提供新思路具有重要意义。全文针对外泌体miRNA在消化系统肿瘤的研究进展作一综述。

长链非编码RNA调控肝癌干细胞的作用下载：25 浏览：348

马睿玲1 王新斌1 张秋菊2 伊琳1 《肿瘤研究》 2020年7期

摘要:

目前常规疗法对晚期、转移或复发肝癌患者疗效差。肝癌干细胞(LCSCs)参与肝癌的发展、侵袭、转移和耐药，与不良预后密切相关，被认为是肝癌治疗的重要靶点。长链非编码RNA(LncRNA)在肝癌中异常表达。最近的研究表明，lncRNAs可能在调控LCSCs的生物学功能中发挥重要作用。全文总结lncRNA调控LCSCs作用的研究现状。

长链非编码RNA与宫颈癌相关性研究进展下载：22 浏览：223

罗丽芳陈秀玮《肿瘤研究》 2020年7期

摘要:

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是长度>200个核苷酸(nt)且无蛋白质编码功能的RNA。近几年研究报道，长链非编码RNA似乎是各种过程中的关键调节剂，并且对肿瘤的发生有严重影响。全文探讨lncRNAs、MALAT1、HOTAIR、CCHE1、BLACAT1、EBIC、ANRIL、SNHG16、NEAT1和SNHG20在宫颈癌发生发展中的作用。

环状RNA与肿瘤：生物标志物和主要调节因子下载：53 浏览：276

陈杰1，2 马承贤1 何侠1，2 尹丽1 《肿瘤研究》 2020年5期

摘要:

环状RNA(circRNA)是一类新近发现的调节RNA，具有结构稳定、高度保守及组织特异表达等性质，其长度大小不一，常见数十到数千碱基对。研究显示，circRNA可作为肿瘤基因表达的主要调节因子，常见的作用方式是充当分子海绵吸附微小RNAs(miRNAs)来调节基因的表达，还可以通过直接调节转录和干扰剪接机制来发挥作用，因而与肿瘤的发生发展关系十分密切。虽然与线性对应物相比丰度较低，但它们通常以组织和发育阶段特异性的方式表达，加上共价闭环结构对RNA酶活性的显著抗性，这使得circRNA作为肿瘤和其他疾病的新型生物标志物显示出巨大的应用前景。全文就circRNA形成机制、功能以及与肿瘤的相关性进行综述。

消化系统恶性肿瘤中BANCR的表达及调控作用研究下载：44 浏览：263

王微娜毕永红张瑞芹关沧海姜兴明《肿瘤研究》 2020年1期

摘要:

肿瘤严重威胁人类生命健康，大量研究已证实恶性肿瘤内存在长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)的失调，且异常表达的lncRNA参与介导侵袭转移、上皮间质转化以及化疗耐药等诸多肿瘤恶性生物学行为。BRAF激活的非编码RNA(BRAF-activated non-coding RNA，BANCR)是新近发现的lncRNA，研究证实BANCR与多囊卵巢综合征、血管平滑肌细胞增殖以及肝癌、胃癌等消化系统恶性肿瘤的发生发展密切相关，并可能成为肿瘤诊治与预后评估的生物学标记物。全文就BANCR在消化系统恶性肿瘤中的表达及其调控作用进行综述。

MiRNA在胰腺癌中的研究进展下载：87 浏览：431

余伟王晓光宋政炜费建国《肿瘤研究》 2020年1期

摘要:

MiRNA作为一类短序列单链分子，通过对靶基因mRNA转录后的调节影响靶基因的表达，从而参与胰腺癌的发生，并调控胰腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移，在明确诊断、判断生存期及预后、调节耐药性和敏感性，以及靶向治疗胰腺癌的诸多环节中均发挥了重要作用。全文就miRNA在胰腺癌研究中的进展进行综述。

环状RNA在肿瘤中的研究进展下载：75 浏览：352

傅志勤1 鲁超2 殷珂欣3 陈雅卿1 《肿瘤研究》 2019年7期

摘要:

[目的]探讨术前血清CA125和HE4对原发性卵巢癌生物学行为及其预后的预测价值。[方法]回顾性分析浙江省肿瘤医院2008年1月至2014年4月间收治的127例原发性卵巢癌患者的病例资料，分析患者术前血清CA125及HE4与病理类型、FIGO分期、组织分级、腹水量、术后残余病灶大小及预后的关系。[结果]术前血清CA125仅与FIGO分期显著性相关(P=0.006)。浆液性卵巢癌、FIGO分期越晚、组织分化越差的患者HE4表达阳性率更高(P<0.05)。CA125与HE4表达与手术残余病灶、腹水量无统计学意义相关性。原发性卵巢癌术后1年生存率为94.7%，3年生存率为78.8%，5年生存率为61.9%。HE4低水平患者的1年生存率及3年生存率显著性优于HE高水平患者；而CA125低水平患者的5年生存率显著性优于CA125高水平患者。[结论]术前血清CA125及HE4均可评估卵巢癌FIGO分期，但HE4更能反映卵巢癌生物学行为，且术前HE4水平可预测卵巢癌1年及3年生存率，而术前CA125水平可协助预测其5年生存率。

RNA干扰STMN1基因表达通过Notch信号通路诱导胃癌细胞凋亡及增强化疗敏感性的研究下载：33 浏览：208

谢彦良1 董亚辉2 郭苹3 《肿瘤研究》 2019年5期

摘要:

[目的]探讨RNA干扰微管不稳定性蛋白(STMN1)基因表达通过Notch信号通路对胃癌细胞凋亡及化疗敏感性的影响。[方法] RT-PCR及Western blotting分别检测人胃黏膜上皮细胞GES-1和人胃癌细胞MKN28、SGC7901、BGC823中STMN1 mRNA及蛋白表达；STMN1-siRNA转染BGC823细胞，同时设定对照组和阴性对照组，转染48h后RT-PCR及Western blotting分别检测STMN1 mRNA及蛋白表达；后续实验分为对照组、STMN1-siRNA组、顺铂组、STMN1-siRNA+顺铂组，细胞培养48h后，CCK8及流式细胞仪分别检测细胞增殖及凋亡情况；Western blotting检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、Hes1蛋白表达。[结果] STMN1在MKN28、BGC823、SGC7901胃癌细胞中的mRNA及蛋白表达均显著高于在GES-1细胞中的表达(P<0.05)，选择BGC823细胞作为研究对象；转染STMN1-siRNA后BGC823细胞中STMN1的mRNA及蛋白表达均显著低于对照组(P<0.05)；STMN1-siRNA组、顺铂组、STMN1-siRNA+顺铂组OD值及Notch1、Hes1蛋白表达均显著低于对照组，细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05)，STMN1-siRNA+顺铂组OD值及Notch1、Hes1蛋白表达均显著低于STMN1-siRNA组和顺铂组，细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达均显著高于STMN1-siRNA组和顺铂组(P<0.05)。[结论] RNA干扰STMN1表达可通过抑制Notch信号通路增强顺铂对胃癌细胞增殖的抑制及凋亡的促进作用。

LncRNA PVT1与恶性肿瘤治疗的研究进展下载：42 浏览：348

潘雪峰1，2 高春芳1 《肿瘤研究》 2019年4期

摘要:

长链非编码RNA-PVT1(lncRNA PVT1)作为一种重要的致癌性非编码RNA在多种恶性肿瘤呈现高表达并提示不良预后，其通过影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡促进肿瘤的发生发展。目前大量的研究表明lncRNA PVT1在多种肿瘤中具有致癌活性或驱动作用，比如以竞争性内源RNA或作为"分子海绵"负性调控肿瘤相关miRNA的表达促进肿瘤发生等，因此，基于lncRNA PVT1在肿瘤发病中的关键作用，进一步的深入研究有望为恶性肿瘤提供新的治疗靶点。

LncRNA AK093987在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及其临床意义下载：50 浏览：355

崔桂荣1 李焱1 贾振薇1 赵洪波1 李沛颖1 罗建民2 《肿瘤研究》 2018年11期

摘要:

[目的]分析Lnc RNA AK093987在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)患者组织标本中的表达，探讨Lnc RNA AK093987的表达与临床预后的相关性。[方法 ]收集临床资料完整的65例弥漫大B细胞淋巴瘤和28例淋巴结反应性增生(reactive lymphoid hyperplasia，RH)组织标本，利用实时荧光定量PCR方法检测组织标本中Lnc RNA AK093987的表达，分析Lnc RNA AK093987表达水平与DLBCL患者临床病理特征及预后的关系。[结果 ]与RH组(1.819±0.165)比较，Lnc RNA AK093987在DLBCL组(8.026±0.357)中的表达明显升高(P<0.001)；Lnc RNA AK093987的表达与肿瘤大小、临床分期、B症状、化疗敏感性及IPI指数相关(P均<0.05)；Lnc RNA AK093987高表达的患者无进展生存时间及总生存时间明显短于Lnc RNA AK093987低表达者(P<0.001)。单因素及Cox回归分析显示，Lnc RNA AK093987表达、化疗敏感性和国际IPI指数是影响DLBCL患者预后的独立因素。[结论]Lnc RNA AK093987在DLBCL中高表达，Lnc RNA AK093987可能成为DLBCL独立的预后肿瘤标志物。

dCas9-gRNA在卡介苗侵染小鼠巨噬细胞过程中对rab7的调控作用下载：71 浏览：482

郭越杨文淇关松磊《生物技术研究》 2020年3期

摘要:

分析rab7及其下游相关分子rilp和rep1在卡介苗侵袭巨噬细胞过程中的作用。[方法]利用CRISPRERA在线设计鼠源rab7-gRNA序列,构建dCas9调控质粒,比较调控前后rab7、rilp和rep1的mRNA表达量。[结果]成功设计3条rab7-gRNA,构建重组调控质粒p X330S-2-d Cas9-gRNA-T2A-EGFP; BCG感染后,巨噬细胞内rab7及其下游的rilp和rep1的mRNA水平明显上升(P <0. 01); gRNA1调控后,rab7及下游rilp的mRNA水平明显下降(P <0. 05; P <0. 01); gRNA3调控后,rab7及rilp mRNA水平有所下降,但无统计学意义(P> 0. 05)。gRNA1和gRNA3调控对rep1 mRNA水平无明显影响(P> 0. 05)。[结论]在BCG侵染巨噬细胞过程中,rab7作为晚期吞噬体的标志受到dCas9调控后变化明显,rilp作为rab7的下游效应分子,表达水平与rab7的变化一致,而rep1未见明显变化。三者在MTB寄生过程中的作用还有待深入研究。

改良Trizol法提取血浆游离RNA 下载：73 浏览：488

陈雪梅李聪丁雨吴思思《生物技术研究》 2019年2期

摘要:

建立一种成本低、得率高的血浆游离RNA的提取方法。[方法]分别采用传统Trizol法、改良Trizol法、试剂盒法提取200μL健康成年人血浆中游离RNA,并比较三种方法所得RNA的浓度、纯度及大小片段RNA得率的差异。[结果]改良Trizol法所得RNA浓度是常规Trizol法的21. 7倍（P <0. 01）,是试剂盒法的6. 4倍（P <0. 01）;三种方法所得RNA纯度(A260/A280)无显著差异;采用RT-q PCR方法检测血浆游离RNA大小片段的回收率,外参秀丽线虫miR-39-3p（cel-miR-39-3p）代表小片段RNA,GAPDH代表大片段RNA,改良Trizol法检测Cq平均值分别为15. 64和33. 34,平均低于常规Trizol法2. 05～3. 62个Cq,低于试剂盒法0. 32～3. 34个Cq。[结论]改良Trizol法提取血浆游离RNA相较于常规Trizol法提高了10～20倍,增加了得率。

鞠传静1 王东霞2 梁斌斌3 卜胜君4 王奎宇4 万家余4 《生物技术研究》 2019年8期

摘要:

建立一种测定miR-21含量新型实验方法。[方法]利用microRNA-21(miR-21)作为靶标,并设计基于双链特异性核酸酶(Duplex specific nuclease,DSN)及杂交链式反应(Hybridization chain reaction,HCR)的探针MP、H1及H2,通过加入靶标从而引起DSN和HCR反应,达到双重信号放大的目的,最终信号输出方式为DNAzyme显色,裸眼可视,根据其产生颜色强度对靶标进行定量检测。[结果]DSN结合HCR靶标的最低检测限可达1 pmol/L,线性范围为1 pmol/L～1μmol/L,特异性良好,除靶标miR-21外,非特异性靶标均无明显信号产生,在人体血清实际样品中检测miR-21,其回收率可达到92. 3%～101. 5%。[结论]该检测方法成功建立测定miR-21含量的技术平台,灵敏性可达1 pmol/L,且特异性好、快速可视,为研究及临床诊断心血管疾病提供技术依托。

甘蔗调控相关MicroRNAs的研究进展下载：76 浏览：486

程琴朱鹏锦吕平谭秦亮庞新华周全光卢业飞《生物技术研究》 2019年7期

摘要:

MicroRNAs(miRNAs)是内源性非编码小RNA,在植物生长发育和环境胁迫时发挥重要的监管作用。甘蔗高度多倍体和基因组特异性导致其相关代谢具有复杂的调控机制,而调控途径涉及许多基因、转录因子和不同内别的RNAs:siRNAs和miRNAs。该文主要论述miRNAs在甘蔗干旱胁迫、其他非生物胁迫、生物量相关特征及糖代谢途径中的表达调控机制。

NF-κB1基因干扰质粒的构建及其对DEV增殖的影响下载：76 浏览：487

贺欣薇1 郑敏2 胡安东1 杨颖3,4 周碧君3,4 程振涛3,4 文明3,4 《生物技术研究》 2019年6期

摘要:

探究NF-κB对DEV增殖是否有影响。[方法]以NF-κB1基因作为靶基因,设计并构建4个不同p GPU6/GFP/Neo shRNA表达载体,通过荧光显微镜法观察转染后细胞荧光密度和RT-PCR检测转染细胞NF-κB1基因转录水平以筛选最佳干扰质粒,分3种不同组别进行干扰实验后,以荧光定量PCR法检测DEV-NP基因表达变化。[结果]所构建的重组质粒p GPU6/GFP/Neo-NF-κB1-2对细胞NF-κB1基因的干扰效率最高,可达78. 77%;除先感染后干扰组对DEV增殖影响不大外,先干扰后感染组与同时感染和干扰组均对DEV增殖呈现出一定的抑制作用,其中先干扰后感染组在第72 h时的沉默效率最高,可达78%,而同时感染和干扰组于第48 h时的沉默效率最高,可达82%。[结论]RNA干扰下调NF-κB1基因会抑制DEV增殖。

LncRNA FQ223609促进血管平滑肌细胞增殖下载：76 浏览：485

吴仙华1 陈伟1 尚丹2 林嘉杰1 许馨1 李芳芳1 孙绍光1 《生物技术研究》 2019年4期

摘要:

构建lncRNA FQ223609真核表达载体,并且探讨其促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的调控机制。[方法]通过RT-PCR扩增得到735 bp的lncRNA FQ223609基因序列,以质粒p CMV-CHA为骨架构建FQ223609真核表达载体,通过HindⅢ/XhoⅠ酶切及测序进行鉴定;将FQ223609真核表达载体及其对照空载体p CMV-C-HA分别转染VSMCs,CCK-8分析细胞活力,Western Blot检测脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。[结果]双酶切及测序鉴定显示插入lncRNA FQ223609 c DNA序列正确; CCK-8结果表明过表达lncRNA FQ223609使VSMCs增殖活力提高22%; Western Blot结果表明LPL和PCNA的表达水平显著上调。[结论]lncRNA FQ223609真核表达载体成功构建; lncRNA FQ223609通过上调LPL的表达,促进VSMCs增殖。

LIN28A在GT1-7细胞中过表达对性发育相关基因的影响下载：84 浏览：489

范雅婷王欣孙贤丽肖君华李凯周宇荀《生物技术研究》 2019年1期

摘要:

在GT1-7细胞过表达LIN28A,研究其与性发育相关基因表达是否存在调控关系; RNA-seq发现LIN28A参与调控性发育的信号通路和基因。[方法]构建LIN28A慢病毒过表达载体,转染GT1-7细胞,Real-Time PCR检测LIN28A和性发育相关基因在mRNA水平表达变化;将过表达LIN28A的GT1-7细胞进行RNA-seq、生物信息学分析、Real-Time PCR验证,找到影响性发育的信号通路和基因。[结果]与对照相比,LIN28A在GT1-7细胞过表达18倍(P <0. 001),KISS1在mRNA水平显著升高(P <0. 01); KEGG分析,LIN28A相关的差异基因在MAPK信号通路差异显著,MAPK通路筛选到多个性发育相关基因(Fgf21、JUN、Cyp1a1、Rasgrp2),Real-Time PCR验证它们在mRNA水平差异显著(P <0. 05)。[结论]成功构建LIN28A慢病毒过表达载体,LIN28A在GT1-7细胞中过表达会促进KISS1的表达,并且LIN28A可能通过MAPK通路调控性发育。

肺癌中LncRNA的表达及其与预后的相关性下载：82 浏览：487

王丹1 沙岩1 吴言1 朴雪1 胡俊峰2 《生物技术研究》 2018年11期

摘要:

筛选出在肺癌组织中特异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),并探讨其在肺癌中的表达水平与患者预后的相关性。[方法]从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)下载肺癌临床病理和基因表达谱信息。以|Fold Change|>2和校正后的P值(FDR)<0.05为标准筛选差异表达的lncRNA。对差异表达显著的FOXD3-AS1进行RNA结合蛋白(RBP)预测,并用关联矩阵法构建差异表达的lncRNA-RBP-mRNA共表达网络,继而对共表达mRNA进行Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路富集分析;通过Kaplan-Meier Plotter方法研究FOXD3-AS1与预后相关性。[结果]共筛选出1 362个在肺癌中差异表达的lncRNA,其中表达上调的1 184个,表达下调的178个。与FOXD3-AS1具有共表达关系的mRNA共有11个。KEGG分析这些共表达的mRNA主要富集在黏着连接、结肠直肠癌和松弛素信号通路,RBP预测发现FOXD3-AS1可以与人丝氨酸/精氨酸富有剪接因子SRSF1结合。FOXD3-AS1与肺癌患者生存曲线具有极显著相关性(P<0.01)。[结论]SRSF1居于lncRNA-RBP-mRNA共表达网络的核心位置,在肺癌的发生、发展中起到重要的调控作用,有望成为肺癌免疫治疗的分子靶标。差异表达的FOXD3-AS1可以很好地判断肺癌患者的预后,因此,可以作为潜在的肺癌检测分子标志物。

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