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Gab2基因在肺癌细胞表达及对癌细胞凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响 下载:21 浏览:252

范亚峰 崔晓燕 虞中平 李海燕 张开明 《肿瘤研究》 2019年9期

摘要:
[目的]探讨Gab2结合蛋白2 (Gab2)基因在肺癌细胞表达及对癌细胞凋亡及Wnt信号/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。[方法]以人胚肺成纤维细胞MRC5作为对照细胞,通过Western bloting检测肺癌H322、A549、PC9、H1299、SPC-A-1细胞中Gab2的蛋白表达;转染48h后Western bloting检测Gab2、Cleaved Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期素D1(cyclin D1)、c-myc蛋白表达;流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。[结果]与MRC5细胞比较,Gab2在肺癌细胞中的表达显著性升高(P<0.05)。与对照组比较,Gab2-siRNA组Gab2的蛋白表达降低,细胞凋亡率升高,Cleaved caspase3和Bax蛋白上调表达,Bcl-2、β-catenin、cyclin D1、c-myc蛋白表下调表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]抑制肺癌细胞Gab2表达能诱导细胞凋亡,机制是下调Wnt/β-catenin信号通路。

R-脊椎蛋白3对小鼠神经干细胞增殖及Wnt/β-catenin通路的影响 下载:87 浏览:520

​王瑞峰1 张昊驹2 戴宜武3 徐如祥3 《神经科学研究》 2018年12期

摘要:
观察R-脊椎蛋白3(Rspo3)对小鼠神经干细胞(NSCs)增殖的影响及其机制。方法分离、悬浮培养孕14~15 d的CD1胎鼠大脑侧脑室下区(SVZ)NSCs并通过免疫荧光法鉴定。取第3代处于对数生长期的NSCs分为实验组和对照组,体积各为1mL。实验组添加储存浓度为50μg/mL的Rspo3蛋白0.8μL(终浓度40ng/mL),对照组添加等体积的NSCs培养液。干预后6h通过BrdU细胞渗入实验法检测2组NSCs增殖情况。干预后4 h和8 h采用Western blotting实验检测β-catenin蛋白的表达。结果免疫荧光染色结果显示90%以上细胞呈巢蛋白和SOX2阳性。经过诱导分化后,部分细胞呈神经元核抗原或胶质纤维酸性蛋白阳性,证明实验中提取分离的细胞为NSCs。BrdU细胞渗入实验法显示实验组细胞增殖率为1.56±0.03,明显高于对照组(1.04±0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting实验显示4 h和8 h时实验组β-catenin蛋白相对表达量分别为1.09±0.10、1.20±0.13,对照组分别为0.56±0.05、0.83±0.04,实验组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Rspo3蛋白可在体外促进小鼠NSCs增殖,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

WntB-catenin信号通路调控自噬在糖尿病视网膜病变中的作用机制研究 下载:35 浏览:362

顾倬 《信号处理与图像分析》 2025年3期

摘要:
本研究旨在明确Wnt/β-catenin信号通路在(Diabetic Retinopathy,DR)过程中对自噬的调控作用,以期为DR的治疗提供新的思路和方法。方法:采用高糖诱导的视网膜上皮细胞模型,模拟糖尿病视网膜病变的体外环境。利用Western Blot、RT-PCR等技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白及自噬相关蛋白的表达水平。同时,利用特异性抑制剂或激动剂干预Wnt/β-catenin信号通路,观察自噬过程变化情况。结果:Wnt/β-catenin信号通路与自噬过程之间存在显著相关性(r=0.85,P<0.01)。同时,自噬的调控与糖尿病视网膜病变的进展也呈正相关(r=0.78,P<0.05)。结论:高糖环境激活了Wnt/β-catenin信号通路,进而促进了自噬过程的发生。自噬的增强与糖尿病视网膜病变的进展密切相关。因此,通过调控Wnt/β-catenin信号通路,有望为糖尿病视网膜病变的治疗提供新的思路和方法。
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