摘要: 为探究病害发生后健康与患病凡纳滨对虾肠道菌群结构和功能的差异，并筛选肠道指示菌群来评估宿主健康状况，评价凡纳滨对虾肠道菌落的功能冗余性。实验采集健康和患病凡纳滨对虾样品，通过Illumina高通量测序技术测定肠道菌群组成，并利用PICRUSt进行功能预测，以此比较健康与患病凡纳滨对虾肠道微生物的群落结构和功能差异，并预测功能与群落组成的相关性。结果显示，病害的发生伴随着肠道菌群结构的显著变化，而多样性无显著差异。与健康凡纳滨对虾肠道细菌组成相比，患病凡纳滨对虾肠道中放线菌门(Actinobacteria)、浮霉菌门(Planctomycetes)和疣微菌门(Verrucomicrobia)相对丰度降低，而γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)增加。同时，筛选出16个指示细菌科，能够很好地指示宿主健康状况。与健康组相比，患病凡纳滨对虾中参与弧菌侵染的过程显著增加，而溶酶体和过氧化物酶等免疫功能代谢过程显著减弱。此外，肠道微生物群落结构与功能组成呈显著正相关，表明凡纳滨对虾肠道菌群组成具有较低的功能冗余性。研究表明，健康与患病凡纳滨对虾肠道菌群结构存在显著差异，并且由细菌介导的功能随之发生改变，能够用指示微生物评估宿主健康状况。

摘要: 针对12株引起凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的致病性副溶血弧菌，运用多位点测序技术，分析致病菌株的遗传特征。实验选择副溶血弧菌的7个管家基因dnaE、gyrB、recA、dtdS、pntA、pyrC及tnaA，对12株AHPND致病菌扩增测序。将核酸序列上传至PubMLST数据库进行比对后获得每株菌的序列型。收集其他地区AHPND致病性副溶血弧菌的多位点序列分型(MLST)数据，采用eBURSTV3及MEGA5.0软件进行遗传进化分析。结果显示，2014年中国广东分离的AHPND致病株属于一个新序列型ST1710(42、134、99、79、141、41、51)，仅与库中ST415及ST975同源性较高。目前，急性肝胰腺坏死致病株的9种ST型可归为2个克隆组和5个单体。经系统发育树进一步分析可知新序列型ST1710与单体ST975遗传关系相近。本研究首次报道中国AHPND分离株的序列型，丰富了PubMLST数据库，并为其遗传进化研究奠定了理论基础。

摘要: 鱼类诺卡氏菌病是一种慢性系统性肉芽肿疾病，鱼诺卡氏菌是其主要病原。鱼诺卡氏菌全基因组生物信息学分析，发现了一个可能靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白——动力蛋白调节蛋白robl/LC7。为了对鱼诺卡氏菌robl/LC7的亚细胞定位和功能进行初步研究，实验对鱼诺卡氏菌robl/LC7进行了基因克隆、真核表达重组质粒构建、分泌蛋白鉴定、亚细胞定位、过表达和凋亡检测。结果显示，成功克隆了鱼诺卡氏菌robl/LC7基因并构建了其真核表达质粒p EGFP-robl/LC7和pc DNA-robl/LC7；鱼诺卡氏菌分泌蛋白质谱鉴定证实robl/LC7为分泌蛋白；亚细胞定位研究显示robl/LC7-GFP融合蛋白呈全细胞分布，不与线粒体共定位；凋亡检测发现robl/LC7过表达能诱导FHM细胞凋亡。研究表明，鱼诺卡氏菌robl/LC7是一个不与线粒体共定位的分泌蛋白，其可能通过参与细胞凋亡调控，协助鱼诺卡氏菌在宿主体内生存和免疫逃避，并在鱼诺卡氏菌的致病过程中具有重要作用。

摘要: 为了阐明山东省潍坊市一对虾养殖场发生日本囊对虾暴发性死亡的原因，采用分子生物学检测方法，对发病对虾进行了白斑综合征病毒(white spot syndrome virus，WSSV)、桃拉综合征病毒(Taura syndrome virus，TSV)、黄头病毒(yellow head virus，YHV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus，IHHNV)、传染性肌肉坏死病毒(infectious myonecrosis virus，IMNV)、偷死野田村病毒(covert mortality nodavirus，CMNV)及急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease，AHPND)7种病原的检测，且对发病对虾进行了常规组织病理学观察。同时采用16S r DNA细菌鉴定方法及浸泡回接感染实验对分离自发病对虾体内的可疑病原菌进行了分子鉴定及毒力测试。结果显示，发病对虾样品核酸检测呈现WSSV强阳性，IHHNV和CMNV为弱阳性，其他4种病原为阴性。组织病理学观察发现，在对虾的胃、鳃等上皮组织中存在WSSV包涵体，头部肌肉纤维出现离散。对分离编号为2901、2902、2903的3株优势可疑病原菌鉴定结果显示，3株菌分别与印度格里蒙菌、交替单胞菌及溶藻弧菌相似，相似度分别为99%、99%及100%。攻毒结果显示，3株可疑病原菌的LC50分别为9.8×107、1.1×108与2.3×108 CFU/m L，各细菌毒力均较弱，非导致对虾出现暴发性死亡的病原。研究表明，导致本次日本囊对虾暴发性死亡的病因与混合感染病原WSSV、IHHNV、CMNV有关，其中WSSV感染是造成日本囊对虾暴发性死亡的主因，研究结果可为解析当前养殖日本囊对虾疾病暴发及其成因提供参考。

摘要: 以斑马鱼和巨噬细胞作为体内、外感染模型，比较无乳链球菌鱼源株GD201008-001与人源株A909的致病性差异，利用iTRAQ技术和质谱分析技术进行差异表达蛋白鉴定，以期为揭示无乳链球菌不同宿主来源株致病机制提供新思路。实验通过测定菌株GD201008-001、A909的斑马鱼半数致死量和巨噬细胞吞噬率，比较二者致病性差异；提取全菌蛋白，经iTRAQ试剂标记后进行质谱鉴定，质谱数据用软件Mascot 2.2和Proteome Discoverer 1.4进行查库(Uni Prot数据库)鉴定及定量分析，并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG通路分析。结果显示，GD201008-001毒力显著高于A909；通过iTRAQ分析两株菌差异表达蛋白，发现差异蛋白涉及的生物学功能较为广泛，在鉴定出的368个差异表达蛋白中，GD201008-001中上调表达蛋白193个(比值>1.5)，下调表达蛋白175个(比值<0.667)。生物信息学分析预测这些蛋白主要涉及26个生物学功能，14个通路，推测Clp X、Glm S和Cps IVK可能在两株菌致病性差异中发挥重要作用。本研究为阐明无乳链球菌不同宿主来源株致病性差异奠定了基础。

摘要: 采用集中质量点法和网目群化法，结合数值模拟技术探讨了桩柱式围网网片单元在水流作用下的力学特性，着重分析了不同网片宽度和固定方式下网片单元的网线张力分布、节点偏移和网片系缚点受力特性。结果显示，水流作用下，桩柱式围网网片的最大张力主要分布于网片顶部和底部力纲的两侧，最大张力值与网片宽度成正比；网片的最大偏移部位主要分布于网片的上下端，最大偏移量与网片宽度成正比；系缚点最大受力出现在网片的顶端和底部，且其受力在数值上均远远大于中间系缚点；研究发现，随着系缚点数的增加，各系缚点的受力不断下降，网线张力和偏移量也迅速减小；当系缚点超过一定数量时，网线张力和偏移量将不再显著下降，表明存在一个临界系缚点数。本研究可为桩柱式围网工程的设计与安装提供参考。

摘要: 对杂交三倍体泥鳅(4n♀×2n♂)的胚胎染色体进行了C带及染色体荧光原位杂交(FISH)分析，首次探讨了杂交三倍体泥鳅C带特征，为准确鉴别染色体提供依据，研究了核糖体5.8S+28S r DNA在杂交三倍体泥鳅胚胎中期染色体上的数目和位置。C带结果表明，杂交三倍体泥鳅的染色体C带包括臂端C带和着丝粒C带，没有发现臂间C带。M染色体只有1号染色体既有臂端C带又有着丝粒C带，但臂端C带均比着丝粒C带大，信号也比着丝粒的强；而其他M染色体及SM染色体、T染色体只有着丝粒C带。FISH分析显示，核糖体5.8S+28S r DNA清楚地定位在杂交三倍体泥鳅中期染色体中部着丝粒染色体(M)的端部区域，在杂交三倍体泥鳅中期染色体上可以检测到三簇杂交信号。该结果从分子细胞遗传学层面进一步证实了杂交三倍体泥鳅是含有三套染色体组的遗传三倍体。

摘要: 趋化因子是一类能够吸引白细胞移行到感染部位的低分子量(8～10 ku)蛋白质，在炎症反应、非特异性免疫反应中具有重要作用。实验克隆了剑尾鱼2个趋化因子基因(CCL4、CCL19)c DNA序列，运用荧光定量PCR技术检测其在健康组织和嗜水气单胞菌感染后肝、脾中的表达情况。结果显示，剑尾鱼CCL4和CCL19开放阅读框长度分别为294和333 bp，分别编码97和110个氨基酸，推导氨基酸序列均含有趋化因子CC家族标志性的4个半胱氨酸残基，与其他物种尼罗罗非鱼、鼠、狗、人、鸡的氨基酸序列相似性比较，CCL4相似度分别为71.1%、33%、33%、31%、23.5%；CCL19相似度分别为62%、26.9%、24.5%、26.6%、27.8%。在检测的健康剑尾鱼8个组织中，CCL4和CCL19均有表达，其中CCL4和CCL19均在脾脏中表达量最高；CCL4在肌肉和肠中表达量较低，而CCL19则在心脏中表达量较低。经嗜水气单胞菌感染后，CCL4在剑尾鱼头肾中12 h表达量达到最高，在肝脏中24 h表达量最高；CCL19在头肾和肝脏中均在24 h时表达量最高。研究表明，趋化因子CCL4和CCL19可能参与剑尾鱼机体免疫调节反应，在抗嗜水气单胞菌感染过程中发挥了重要作用。

摘要: 为获得三疣梭子蟹线粒体全基因组(mt DNA)SNP突变位点，本研究针对其mt DNA全序列设计了179对引物，采用高分辨率熔解曲线(HRM)检测技术对SNP进行了筛查。在179对引物中，有89对引物具有特异性扩增结果；进一步研究表明，89对引物中共有22对引物的扩增区域含有SNP突变位点，共包含24个SNPs。统计结果显示，三疣梭子蟹线粒体基因组中的SNP分布频率为0.15/100 bp，其中转换突变比例为79.1%、颠换突变比例为16.6%；C/T(G/A)突变比率为79.1%、G/T(C/A)突变比率为8.3%、A/T突变与G/C突变的比率均各占4.16%。本研究中所获得的SNP位点分布于三疣梭子蟹线粒体基因组的11个区域，且分布不均。其中COX1基因区域的SNP数目最多，其次在D-LOOP、ND1基因区域分别为3和4个SNP位点；而t RNA、12S r RNA等其他区域尚未发现突变位点。本研究所建立的三疣梭子蟹线粒体全基因组SNP的快速筛查方法及发现的SNPs，为进一步开展三疣梭子蟹种质遗传资源多样性、增殖放流标记等方面的研究提供了分析工具。

摘要: 为了解Sox14基因在拟穴青蟹胚胎发育和性腺发育过程中可能起到的调控作用，实验从青蟹性腺转录组数据库中得到全长为2558 bp的Sp-Sox14 c DNA序列，该序列编码一个包含427个氨基酸的蛋白，包含一个HMG-box。进化树分析表明，Sp-Sox14与其他节肢动物的Sox14亲缘关系较近。实时定量PCR结果显示，Sp-Sox14在成蟹雌雄各组织中均有不同程度的表达，其中在卵巢和雄蟹心脏中的表达量最高。在胚胎发育过程中，SpSox14在复眼色素形成期的表达量显著高于其他时期。在性腺不同发育阶段，Sp-Sox14在卵黄发生前期(O2)的表达量显著高于卵巢其他发育阶段；而在精巢发育过程中，其表达量在成熟精子期(T3)高于精母细胞期(T1)和精子细胞期(T2)。推测其参与卵巢的前期发育以及精子成熟等过程。整胚原位杂交结果显示，Sp-Sox14在青蟹胚胎复眼色素形成期阳性信号定位于头部以及鄂足附近，在近孵化期定位于复眼附近，幼体孵出期则在头部仍有少量信号，暗示其与青蟹神经器官的形成以及体节附肢的发生有关。

摘要: 为获取2001年低温冻存栉孔扇贝感染牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)变异株(ZK2001)基因组序列，并分析ZK2001与其他Os HV-1变异株的序列差异和系统发育关系，利用基于长片段PCR的基因组DNA的扩增和富集技术，获取2001年栉孔扇贝感染Os HV-1变异株的基因组DNA；再使用Illumina Hiseq 2500 PE250高通量测序平台对其测序。最后分析ZK2001与Os HV-1其他变异株基因组的序列差异和系统发育关系。测序数据组装后获得8个Scaffold。基因组变异分析结果显示，ZK2001与参考基因组相比存在328个SNP位点，SNP和序列插入/缺失变异是导致Os HV-1基因组序列变异的主要变异类型。系统发育分析结果显示，ZK2001变异株与分离自我国的Os HV-1变异株亲缘关系最近，与分离自欧洲的Os HV-1μvar及其相关变异株的亲缘关系最远，说明中国和欧洲分布Os HV-1间存在因地理隔离导致的遗传分化。研究表明，基于长片段PCR的DNA富集技术，可以有效地扩增和富集冷冻样本中Os HV-1基因组DNA，并应用于高通量测序。Os HV-1不同变异株基因组序列数据的获取和积累，将为其基因组尺度的基因变异、株系演化和系统发育关系等研究提供重要基础。

摘要: 为初步了解南澳岛白沙湾海藻养殖区鱼类资源状况，利用便捷式分裂波束式Simrad EY60科学探鱼仪，于2015年4月28日、12月2日与2016年4月19日对该海域进行3次声学调查，结果显示，3次调查中藻区内、外鱼类资源丰度密度分别为3.45/1.38×105、0.63/1.45×105、3.67/2.98×105尾/n mile2。藻区内春季鱼类资源量显著高于冬季，资源丰度密度随季节变化显著；藻区外资源丰度密度变化较小且均匀；藻区内、外鱼类资源丰度密度最高值出现于2～6 m水层，6～8 m次之，表、底层最小，资源丰度密度受深度影响显著。在海藻养殖期间，藻区内鱼类资源丰度密度较藻区外大且年变化明显，表明海藻生物量对鱼类资源量及其分布变化具有一定影响。本次调查通过声学评估技术对海藻养殖区鱼类资源进行初步评价，为其具有改善水质环境、恢复渔业资源的作用提供理论依据。

摘要: 为了构建团头鲂耐低氧新品种，实验从鄱阳湖引进和挑选野生优良亲本为奠基群体F0，2009年–2011年通过群体选育获得F1，2011年再通过群体选育实现了F1到F2的传代。2012年，以鄱阳湖选育F2亲本和团头鲂"浦江1号"F9亲本为基础，经夏、秋季2次低氧胁迫，筛选出536尾耐低氧能力强的F2亲本，构成团头鲂耐低氧F2。2013年，挑选个体大、体形好的F2亲本(雌鱼50尾、雄鱼48尾)建立了24个F3家系群体(2♀×2♂群体22个、3♀×2♂群体2个)，共100个F3家系。对上述F3家系群体进行1龄阶段的低氧胁迫养殖，通过测定相应生长指标和耐低氧性状，共筛选出5个快速生长家系群体(A2、A3、A18、A19和A20)和6个生长较快的家系群体(A4、A6、A17、A25、A27、A28)，微卫星分析其分别归属于20个和28个家系。结果显示，团头鲂的生长性能指标与耐低氧性状呈正相关。在1龄阶段长时间低氧胁迫养殖条件下，团头鲂耐低氧F3中耐低氧能力强的家系的体质量显著大于耐低氧能力弱的家系，选育出的团头鲂耐低氧F3家系在2龄阶段同样保持了快速生长特征。本研究旨在建立团头鲂耐低氧F3新品系，以供后续团头鲂耐低氧新品种的选育。

摘要: 为了探讨不同主养模式池塘养殖期间沉积物—水界面氮磷营养盐通量变化特征以及与环境因子之间的相互关系，利用沉积物—水界面营养盐扩散通量的原位观测装置，分析了2013年4—10月主养草鱼和主养黄颡鱼池塘沉积物—水界面营养盐交换通量，并探讨了影响营养盐交换通量的因素。结果发现:(1)在养殖初期，各种形态氮磷在养殖池塘沉积物—水界面主要表现为从上覆水向沉积物的沉积，养殖中后期，由于温度升高以及池塘沉积物中营养物质的大量累积，各种形态氮磷表现为以沉积物向上覆水扩散为主，表明池塘沉积物是氮磷营养盐的源与汇；(2)两种不同主养模式池塘氮磷通量的统计结果表明，沉积物—水界面-N、-N和-P通量变化无显著差异，而-N、TN和TP通量有显著差异；(3)上覆水中DO含量的升高显著促进界面间-N和-N释放通量，而-N和-P释放通量与上覆水DO浓度成显著负相关；温度的升高对各种无机形态的氮磷通量有显著的促进作用。

摘要: 为进行三疣梭子蟹外观特征的研究，本研究通过计算机视觉技术建立三疣梭子蟹背部白色斑纹评估方法，经人工对比验证其准确性达100%。在此基础上，对来自海域的30只三疣梭子蟹[平均体质量(2.8±0.56)g]进行跟踪观察，发现蜕壳前后白色斑纹数量和位置保持不变，而白色斑纹面积和斑纹区域面积则会随着蜕壳后蟹壳面积的增加而扩大；蜕壳后，白色斑纹面积增加89.33%±8.61%，斑纹区域面积增加90.51%±7.95%，蟹壳面积增加94.66%±8.26%，均显著正相关。为进一步研究不同海区梭子蟹白色斑纹分布特征，对来自朝鲜、中国辽宁和浙江等不同海区的三疣梭子蟹进行白色斑纹个数(N)、白色斑纹面积(S1)、斑纹区域面积(S2)、白色斑纹面积百分比(R1)、斑纹区域面积百分比(R2)和密度(D)等6项参数分析，结果发现，不同海区三疣梭子蟹斑纹性状存在显著特点，朝鲜海区呈现斑纹小、分布面积少、占蟹壳总面积比例低的特点；辽宁海区呈现斑纹小、分布面积多、占蟹壳总面积比例高的特点；浙江海区呈现斑纹大、分布面积少、占蟹壳总面积比例低的特点。本研究将计算机视觉技术应用于水产养殖研究，通过建立评估参数阐明三疣梭子蟹白色斑纹的生长规律，揭示了不同群体的三疣梭子蟹白色斑纹具有地理多样性的特征。

摘要: 为研究饲料中添加3种不同的碳水化合物对大黄鱼生长性能、饲料利用以及糖代谢关键酶活性的影响，进行为期8周的生长实验和持续24 h的饥饿实验。以葡萄糖、小麦淀粉和糊精这3种碳水化合物作为糖源，设计3组等氮等脂(48%粗蛋白和12%粗脂肪)的饲料。选用初始体质量为(8.51±0.02)g的大黄鱼450尾，随机分为3组(每组3个重复，每个重复50尾)。养殖实验结束后进行饥饿实验，分别在饥饿实验开始后的0、1、3、5、7、9、11和24 h取样。结果显示，小麦淀粉组和糊精组大黄鱼的增重率和特定生长率显著高于葡萄糖组，且这2个饲料组的饲料系数显著低于葡萄糖组。糊精组大黄鱼的肝体比显著高于其余2组大黄鱼的肝体比。饲料中添加3种不同碳水化合物对大黄鱼成活率、脏体比和肥满度无显著性影响。葡萄糖组和小麦淀粉组大黄鱼血糖含量在饥饿1 h后都开始显著上升，葡萄糖组高血糖水平持续至少10 h；小麦淀粉组3 h显著下降至初始水平左右，未达到高血糖水平；糊精组大黄鱼血糖含量随着时间的推移持续升高，在11 h达到最大值，高血糖水平持续4 h。饲料中添加3种不同碳水化合物对大黄鱼血清胰岛素和肝糖原含量有显著性影响。小麦淀粉对大黄鱼肝脏葡萄糖激酶(GK)活性的升高有诱导作用。大黄鱼摄食3种不同碳水化合物饲料后鱼体血糖水平升高，但糖异生关键酶如葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、果糖-1，6-二磷酸酶(FBPase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的活性并不降低。饲料中添加葡萄糖和小麦淀粉对大黄鱼肝脏丙酮酸激酶(PK)活性有显著性影响。研究表明，大黄鱼利用结构复杂的多糖(如小麦淀粉和糊精)的能力要高于单糖(如葡萄糖)，3种不同碳水化合物对大黄鱼血糖调节及糖酵解和糖异生途径关键酶活性的影响存在差异。

摘要: 为探讨鲁氏耶尔森菌侵染虹鳟的致病机制，本实验建立了鲁氏耶尔森菌感染虹鳟引起的肠炎红嘴病的病理模型，制定相应的临床症状及组织病理学评分系统，并对该模型进行研究。将43尾平均体质量约为12 g的健康虹鳟随机分成5组:3个实验组(n=30)、对照组(n=10)和哨兵组(n=3)。3个实验组分别采用2.0×106、2.0×107和2.0×108 CFU/m L的鲁氏耶尔森菌感染浓度，通过腹腔注射方式进行人工感染试验。对感染鲁氏耶尔森菌的虹鳟肠、肝脏、脾脏和肾脏组织进行镜检及临床症状、剖检病变判断，结合细菌学检测，按制定的评分系统评价各组肠炎红嘴病造模效果，确定最佳造模方案。结果显示，各攻毒组虹鳟感染后72 h均出现不同程度死亡，临床症状表现为红嘴、肛门红肿、鳍(胸鳍、腹鳍、臀鳍)等出现不同程度充血，下颌部、腹部出现出血点等。组织病理学可见肝脏、脾脏、肾脏及肠组织均有炎性细胞浸润现象出现，肝细胞、肠上皮细胞和肾小管上皮细胞等实质细胞变性、坏死，脾脏部位淋巴细胞减少、红细胞死亡堆积。综合各组得分发现，2.0×107 CFU/m L组的鲁氏耶尔森菌感染虹鳟造模效果最佳，患病虹鳟的临床症状显著且组内差异较小，病程迁延较长，便于研究。研究表明，对体质量约12 g的虹鳟幼鱼腹腔注射0.1 m L浓度为2.0×107 CFU/m L的鲁氏耶尔森菌可成功构建肠炎红嘴病病理模型。

摘要: 与传统的母系遗传不同，双壳贝类线粒体有M和F型2种mt DNA，称为双单亲遗传(doubly uniparental inheritance，DUI)。为了探究DUI的形成机制，实验利用RACE方法得到三角帆蚌M、F-type COⅡ基因的cDNA全长；荧光定量检测各时期各组织中M、F-type COⅡ基因的表达。结果发现，(1)M-type COⅡ基因的cDNA序列全长1244 bp，F-type COⅡ基因的cDNA序列全长808 bp，M型3′端较F型有一段546 bp的特异性延长序列；跨膜结构预测显示M-type COⅡ基因3′特异性延伸区域有4个跨膜结构，推测这段延伸序列具有一定的功能性；(2)早期幼龄(胚胎期-5月龄)三角帆蚌的组织团中，M、F-type COⅡ基因均能检测出，且同时期中F-type COⅡ基因的表达量显著高于M-type COⅡ；(3)6月龄蚌各组织中，F-type COⅡ基因在各组织中表达量明显高于M型的表达量，而M-type COⅡ基因在性腺中表达明显高于其他组织；(4)一龄雌性各组织中，M、F-type COⅡ基因均有表达；而一龄雄性各组织中，M-type COⅡ基因仅在性腺中表达；(5)二龄雌性各组织中，M、F-type COⅡ基因均有表达；二龄雄性各组织中，F-type COⅡ基因除性腺外的其他组织中均有低量表达，M-type COⅡ基因仅在性腺中表达，且表达量较高。研究表明，在三角帆蚌雌雄个体发育过程中，M-type mt DNA在组织中选择性降解或聚集。

摘要: B型清道夫受体是清道夫受体超家族成员，可识别多种配体，在机体脂类转运及免疫防御过程中发挥重要作用。为深入研究三疣梭子蟹B型清道夫受体(Pt-SRB)的功能，本实验在前期工作基础上构建了Pt-SRB胞外结构域原核表达载体，并成功获得了重组蛋白rPt-SRB。利用亲和层析方法获得纯化的rPt-SRB，并将纯化rPt-SRB蛋白免疫大鼠获得抗rPt-SRB重组蛋白免疫抗血清以用于后续研究。SDS-PAGE检测发现，体外诱导表达重组rPt-SRB以包涵体的形式出现在大肠杆菌BL21裂解液的沉淀中，分子量大小约为49.18 ku。Western-Blot分析表明，大鼠抗rPt-SRB血清能与rPt-SRB特异性结合。本实验还利用免疫荧光技术，对Pt-SRB在三疣梭子蟹血淋巴细胞的定位及不同组织中的分布进行研究。结果显示，Pt-SRB在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏、肌肉组织中均有分布，但不同组织中Pt-SRB的分布不同。免疫荧光结果显示，绿色荧光信号在消化道及腺体结缔组织中较强，另外在肝小管上皮、鳃丝上皮细胞中亦有较强的阳性信号，表明PtSRB蛋白在上述组织结构中分布较广；在血淋巴细胞中，绿色荧光信号主要分布于细胞质和细胞膜，在细胞核中没有明显荧光信号，提示Pt-SRB在三疣梭子蟹血淋巴细胞的细胞质和细胞膜上表达。本结果将为三疣梭子蟹B型清道夫受体蛋白的生理及免疫学功能的研究奠定基础。

摘要: 为了探究大型海藻和人工鱼礁对鱼类的诱集作用，依据崂山湾人工鱼礁区游泳动物和大型海藻调查结果，以海黍子、孔石莼、带形蜈蚣藻、石花菜和小珊瑚藻5种优势藻类，许氏平鲉和大泷六线鱼2种优势鱼类以及人工鱼礁模型为研究对象，于室内实验水槽观察了许氏平鲉和大泷六线鱼幼鱼在海藻和模型礁中的行为反应和分布。结果显示，水槽中未投放模型礁和海藻时，实验鱼密集出现在水槽边缘区（A9），分布率分别为75.71%±7.79%和73.63%±4.41%。放入模型礁和海藻丛后，许氏平鲉和大泷六线鱼出现短暂的排斥反应，然后迅速聚集其中；2种鱼对带形蜈蚣藻的响应时间最短[（12.75～21.00）s]，对模型礁的响应时间最长[（66.50～151.25）s]；带形蜈蚣藻聚集许氏平鲉用时最短[（151.50±8.14）s]，海黍子聚集大泷六线鱼用时最短[（56.00±2.53）s]；大泷六线鱼对模型礁的聚集时间为（216.25±5.59）s，远低于许氏平鲉（1343.50±5.38）s；2种鱼在模型礁中的停留时间远长于海藻丛，且大泷六线鱼的停留时间（211.85±7.96）s长于许氏平鲉（199.75±16.82）s。海藻丛和模型礁对2种岩礁性幼鱼的诱集效果明显，实验区幼鱼的分布率由未投放模型礁和海藻前的0.91%8.78%上升到4.21%31.42%；高密度带形蜈蚣藻和海黍子的诱集效果最好，对许氏平鲉和大泷六线鱼的聚集率分别达到30.42%±1.14%和31.42%±1.74%，而低密度小珊瑚藻的诱集作用不明显。