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基于Nrf2/HO-1启动子筛选抗水生病毒药物的方法
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摘要:
为建立基于Nrf2、HO-1启动子活性的抗病毒药物筛选方法,实验以胖头鱥上皮细胞系(FHM)为材料,构建Nrf2、HO-1启动子重组质粒,利用双荧光素酶报告系统检测不同浓度(0、3.1、6.3、12.5、25.0、50.0μg/mL)的白藜芦醇、水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素对启动子活性的影响,并利用鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)和蛙虹彩病毒(rana grylio iridovirus,RGV)验证阳性药物的抗病毒效果。结果显示,Nrf2、HO-1启动子序列中存在FOX家族、IRF家族等多种转录因子的结合位点,并分别存在1个和3个与甲基化相关的CpG岛。双荧光素酶报告实验显示,水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素可激活Nrf2、HO-1启动子。药物浓度梯度实验显示,6.3μg/mL的姜黄素和穿心莲内酯可显著上调Nrf2和HO-1的启动子活性。病毒感染后的细胞病变效应、病毒的复制及病毒滴度结果均表明姜黄素和穿心莲内酯可抑制SVCV和RGV的感染。综上,本实验建立的pGL3-Nrf2和pGL3-HO-1启动子报告质粒,可用于抗水生病毒药物的筛选,也为Nrf2、HO-1转录调控机制的研究提供了工具。
马氏珠母贝α-Tubulin基因结构、SNP筛选及耐低温相关性分析
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摘要:
为了探究马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)α-Tubulin基因在低温适应性中的作用,通过RACE克隆技术获得马氏珠母贝α-Tubulin基因,分析了α-Tubulin基因在低温胁迫下的表达趋势,并筛选和比较了马氏珠母贝耐低温选育系(R)F3和北部湾野生群体(W)的α-Tubulin编码区SNP位点。结果表明:马氏珠母贝α-Tubulin基因总长为2 107bp,可编码454个氨基酸,具有典型的Tubulin和Tubulin-C结构域;全组织定量显示,α-Tubulin基因在所有组织中均有表达,在足部中表达量最高(P<0.05);低温胁迫时,鳃组织中α-Tubulin基因在低温组(12、17℃)的表达量均在72h时达到最高,且显著高于对照组(22℃)(P<0.05);α-Tubulin外显子区域共有34个SNP,其中3个SNP位点的基因型频率在R和W群体间有显著性差异(P<0.05);连锁不平衡分析显示,R群体单倍型CCTCAGCGCC的频率明显高于W群体。研究表明,α-Tubulin为参与调节马氏珠母贝低温适应过程中的候选基因,筛选出的与抗低温性状相关的SNP位点g.111071125及优异单倍型CCTCAGCGCC,可作为选择育种的候选标记。
微生物降解技术在污水处理中的应用与改进探讨
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钢铁冶金用废渣分离装置运用浅析
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自体牙移植修复单颗牙缺失预后因素的筛选及分析
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新闻编辑流程中的信息筛选与价值判断研究
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使用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱法筛选受偏二甲肼污染土壤中的转化产物
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摘要:
本文介绍了一种基于SPME的新方法,用于对高度反应性和毒性的偏二甲肼(UDMH)的转化产物进行取样和分析,偏二甲肼在火箭中用作燃料。研究了几个参数的影响,以优化分析物回收。研究发现,85μm Carboxen/聚二甲基硅氧烷纤维涂层为所选UDMH转化产物提供了最高的选择性。最佳取样/样品制备参数确定为40 ℃下的1小时土壤顶空取样时间。GC入口温度优化至170 ℃,保持0.1分钟,然后1 ℃ s−1斜坡至250 ℃,并保持40分钟。温度编程导致快速解吸,GC入口中的化学转化最小。SPME非常有效地从被火箭燃料污染的土壤样品中提取UDMH转化产物。由于自动化和使用简单,SPME的使用导致了高灵敏度、高速度、低劳动力消耗。结果表明,向土壤中添加水导致UDMH几乎所有目标转化产物的回收率显著降低。使用SPME进行取样和样品制备,共检测到21种与土壤中UDMH转化相关的新化合物。此外,确认的UDMH转化产物的数量从15个增加到27个。这种取样/样品制备方法可用于对受空间火箭活动影响地区的土壤样品进行环境评估。
土壤环境监测基础点位布设分析
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土壤重金属吸附材料的筛选及机理分析
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基于材料基因工程设计筛选耐高温易加工聚酰亚胺分析
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中药抗氧化活性成分的筛选及其作用机理探讨
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