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异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用
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摘要:
为制备抗异育银鲫Carassius auratus gibelio IgM单克隆抗体,以单克隆抗体为工具构建鲫血清中鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)特异性抗体酶联免疫检测技术,运用硫酸铵盐析结合Protein A亲和层析法,从异育银鲫血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM。结果表明:经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,纯化的血清IgM主要有两条蛋白带,相对分子质量分别为82 000和25 000,分别为异育银鲫IgM的重链和轻链;以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了5株抗异育银鲫IgM单克隆抗体,分别命名为8G1、7C6、8C2、8C5和5C2;抗体分型结果显示,8G1、8C2、8C5和5C2均为IgG1亚型,7C6为IgG2b亚型;免疫印迹分析显示,5株单抗均可特异性识别相对分子质量为25 000的IgM轻链分子;间接免疫荧光分析显示,5株单抗均可与异育银鲫脾脏中部分白细胞发生特异性结合,阳性细胞表面呈现绿色点状荧光信号;用鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒粒子包被酶标板,以抗异育银鲫IgM单抗作为检测一抗,碱性磷酸酶标记羊抗鼠Ig作为检测二抗,构建了鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,进一步优化显示,该技术中最佳单抗为8C5,最佳二抗稀释度为1∶2 000,鲫血清最佳稀释度为1∶20。研究表明,本研究中成功制备了抗异育银鲫IgM单克隆抗体,并以此为工具构建了检测鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术,研究结果可为今后开展异育银鲫特异性免疫应答研究及CyHV-2疫苗效果评价提供科学参考。
乙型肝炎患者的血清免疫球蛋白水平临床检验效果观察
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摘要:
目的:检验血清免疫球蛋白的表达水平,探讨其在乙型肝炎患者病情判断中的重要作用,从而为指导临床治疗提供可靠依据。方法:于2019年12月--2020年12月就诊于本院93例乙型肝炎患者作为临床对象并作为乙肝组,另抽选健康志愿者93例作为对照并纳入常规组,比较两组血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)的表达水平;同时对比轻中重度乙型肝炎患者血清免疫球蛋白表达水平。结果:乙肝组血清免疫球蛋白表达水平较常规组更高,两组结果有明显差异(P<0.05);重度乙型肝炎患者血清免疫球蛋白表达水平较轻中度患者更高,检验结果有明显差异(P<0.05)。结论:与健康正常人相比,乙型肝炎患者普遍存在较高的血清免疫球蛋白水平,且随着病情恶化、加重,其血清免疫球蛋白表达越高,有助于临床准确把握患者病情严重程度,为临床进行针对性诊治提供更多的指导。
血清中免疫球蛋白检验在乙型肝炎诊治中的临床价值研究
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摘要:
探讨乙型肝炎诊治中血清中免疫球蛋白检验的应用价值。方法:研究对象为2019.9-2020.9月在我院收治的80例乙型肝炎患者以及80例同期接受体检的健康人群,乙型肝炎患者根据病情严重程度划分为轻症组(48例)和重症组(32例),后者为对照组。均接受血清免疫球蛋白检验,比较血清IgG、IgA和IgM水平。比较治疗有效组和无效患者的血清总胆红素(TBIL)和免疫球蛋白及凝血酶原活动度(PTA)。结果:重症组的IgG、IgA和IgM水平均明显高于轻症组(P<0.05)。乙型肝炎患者治疗有效例数为58例,无效22例,治疗有效组IgG、IgA、IgM水平和TBIL低于无效组(P<0.05),PTA高于无效组(P<0.05)。结论:血清中免疫球蛋白检验具有较高的临床应用价值,通过该检验方式有助于体现乙型肝炎患者肝细胞受损情况,能够为临床疾病诊治提供重要参考依据。
大剂量免疫球蛋白加美罗培南应用在新生儿败血症的治疗中的效果研究
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