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NF-κB1基因干扰质粒的构建及其对DEV增殖的影响 下载:76 浏览:503

贺欣薇1 郑敏2 胡安东1 杨颖3,4 周碧君3,4 程振涛3,4 文明3,4 《生物技术研究》 2019年6期

摘要:
探究NF-κB对DEV增殖是否有影响。[方法]以NF-κB1基因作为靶基因,设计并构建4个不同p GPU6/GFP/Neo shRNA表达载体,通过荧光显微镜法观察转染后细胞荧光密度和RT-PCR检测转染细胞NF-κB1基因转录水平以筛选最佳干扰质粒,分3种不同组别进行干扰实验后,以荧光定量PCR法检测DEV-NP基因表达变化。[结果]所构建的重组质粒p GPU6/GFP/Neo-NF-κB1-2对细胞NF-κB1基因的干扰效率最高,可达78. 77%;除先感染后干扰组对DEV增殖影响不大外,先干扰后感染组与同时感染和干扰组均对DEV增殖呈现出一定的抑制作用,其中先干扰后感染组在第72 h时的沉默效率最高,可达78%,而同时感染和干扰组于第48 h时的沉默效率最高,可达82%。[结论]RNA干扰下调NF-κB1基因会抑制DEV增殖。

一种HER2阳性乳腺癌靶向药的制备优化及检测 下载:81 浏览:483

彭延杰1,2 丁艳3 曹强庚1,2 《生物技术研究》 2019年4期

摘要:
验证及提高乳腺癌靶向药物TP25粗制品活性,判断TP25杀伤癌细胞方式。[方法]配置含有精氨酸及还原型谷胱甘肽的复性液,并设置复性液p H为8. 5与9. 5,分别利用透析法与稀释法进行复性; MTT法验证TP25对乳腺癌细胞(SK-BR-3)的靶向性识别与杀伤作用;使用Casepase-1抑制剂z-YVAD-CHO确定TP25导致SKBR-3死亡的方式。[结果]优化制备工艺后粗制品的IC50(50%抑制浓度)由0. 051 0μg/m L提高至0. 029 9μg/m L;z-YVAD-CHO抑制实验中,4、19、22、25、28 h结果 P值均小于0. 01。[结论] TP25对乳腺癌细胞(SK-BR-3)杀伤作用具有明显的靶向性;采用稀释复性工艺后TP25粗制品的比活比初始值提高了41%; TP25可引起SK-BR-3发生细胞焦亡(Pyroptosis)。

DNA模板中发卡结构对定量PCR扩增的影响 下载:84 浏览:505

范慧君1 王静1,2 梁兴国1,2 《生物技术研究》 2018年9期

摘要:
探究模板引物结合区发卡对定量PCR的影响及优化方法。[方法]用分布连接法构建一系列在模板引物结合区含环大小为5~60 nt,茎长9 bp的DNA模板,考察发卡环部大小、茎干区GC含量对q PCR扩增效率的影响,再针对引物浓度、引物长度及退火温度来优化含发卡结构DNA模板的扩增。[结果]环区为5~40 nt时,其Ct值比对照组高1.3~4.2,对q PCR的抑制作用与环大小成负相关;茎长9 bp发卡结构当GC含量达3 bp以上时会对定量扩增产生明显抑制作用;增加引物长度、提高引物浓度和退火温度可提高发卡模板的扩增效率。[结论]模板引物结合区环大小在40 nt以内,茎长达9 bp的发卡结构对q PCR扩增会产生抑制作用,通过增加引物长度、提高引物浓度和退火温度可缓解此类抑制。

鸡马立克氏病的诊断与防治 下载:10 浏览:427

高军攀 《当代畜牧兽医》 2019年8期

摘要:
鸡马立克氏病在鸡群中是感染率和致死率较高的病症之一,对于鸡场的养殖来说具有较大的威胁,为了能够减少该病的危害,将养殖场的损失降到最低,需要对该病症进行有效的监控和诊断,从而能够尽早的发现,及时的采取相关措施,控制鸡马立克氏病在鸡群中的蔓延,另外,还要加强对养殖场的有效管理,使其卫生状况能够得到有效的改善,从而保障鸡群的健康成长。

牡蛎降糖肽的结构表征及其协同花色苷的活性增效作用 下载:48 浏览:290

蒋美龄1 陈忠琴1,2 秦小明1,3 孙旭佳1 曹文红1,2,3 林海生1,3 高加龙1,3 《中国水产学报》 2023年3期

摘要:
为探讨牡蛎肽(oyster peptide)的降糖作用及消化稳定性,以香港牡蛎(Grassostrea hongkongensis)为原料制备牡蛎肽,对其结构特征进行表征,通过体外降糖模型及模拟胃肠消化模型考察牡蛎肽的降糖活性及消化稳定性,并利用花色苷协同提高牡蛎肽消化稳定性和降糖活性。结果表明:牡蛎肽含有丰富的疏水性氨基酸,相对分子质量主要集中在1 000之内;肽谱分析显示,牡蛎肽含有LYF、TLFLK、IRAGYD、TLHHRVH、ARNEANVNIY、CVIGR等15条肽段,具有显著的降糖肽结构特征;牡蛎肽对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)的半抑制浓度(IC50)分别为(3.66±0.47)、(8.62±0.66)、(2.60±0.46) mg/mL,具有良好的降糖活性;牡蛎肽的消化稳定性相对较差,经体外模拟胃肠消化后,其α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和DPP-Ⅳ酶的抑制率显著下降了6.23%~32.48%(P<0.05);通过组合花色苷设计协同矩阵,选用Highest Single Agent(HSA)模型计算组合效果,结果显示,牡蛎肽和花色苷对α-葡萄糖苷酶(HSA协同得分3.503)、α-淀粉酶(HSA协同得分3.632)和DPP-Ⅳ(HSA协同得分3.156)具有协同抑制作用,经体外模拟胃肠消化试验验证,花色苷可以提高牡蛎肽的消化稳定性。研究表明,牡蛎肽具有降糖活性肽的特征结构,其与花色苷协同后具有显著的消化稳定性和降糖活性增效作用。

水产加工副产物源抗氧化肽的研究现状与展望 下载:89 浏览:511

周德庆1 李娜1,2 王珊珊1 刘楠1 马玉洁1 《水产研究进展》 2019年1期

摘要:
我国是水产资源大国,近年来的水产加工业发展较快,产生了大量水产品加工副产物。其中许多副产物的蛋白质含量较高,可通过酶解得到不同功能性活性肽,进而实现高值化的利用。提高对水产品加工副产物的利用不仅可以减少资源的浪费,提高资源利用率,而且对降低企业成本,增加企业经济效益,减少环境污染也具有重要现实意义。本文主要对水产品加工副产物制备抗氧化肽的来源、抗氧化肽分离纯化方法、抗氧化检测评价方法以及抗氧化肽作用机制的研究进展进行综述。

研究治疗用生物制品上市后变更的药学可比性 下载:36 浏览:1717

孙淑静 杨瑞丰 《生物学报》 2025年4期

摘要:
治疗用生物制品的变更随着我国生物制药技术的不断发展而日益增多,企业提出变更后,需根据相关法规对产品进行可比性的研究,来对产品变更前后是否存在安全性、有效性层面的差异进行评估。对这一问题的研究将具有较高的实用价值。本文就药学可比性研究中的生产原料、生产工艺、质量标准、质量特定等层面的可比性作出了分析,并在此基础上提出了生物制品上市后变更的建议。

细胞培养技术生产药品和生物制品安全性问题探讨 下载:53 浏览:613

张春霞 《生物技术研究》 2025年2期

摘要:
随着现代生物科学技术的快速发展,用细胞培养技术进行生产药品变得可行,同时,相关药品对于一些疑难杂症的治疗,也具有较为良好的效率。但基于生物制品的安全性考虑,生物制品的具体应用安全则受到人们的质疑。对此,本文对三种不同基质的特点,对如何采用适宜检定方法进行质量的控制进行说明,旨在印证生物制品的安全性。希望能够为有关企业及人员提供参考。

找准问题,对症下药——食品安全检验检测体系存在的问题与对策研究 下载:245 浏览:2196

何苗1 戴嘉乐1 陈兴2 杨硕1 付婧超1 郜金金1 张琳琳1 《中国食品与营养》 2023年10期

摘要:
在近几年来,我国在食品行业发展方面已经逐渐的趋向成熟,具备供给有余、数量充足和品种丰富等诸多特点。但在满足大众对食品需求的同时,行业也依旧存在着一定的安全和质量问题。因此,在新时期的背景下应该将更多的关注点放在食品检验这一方面,对检验检测的质量持续的进行提高和强化。从而在无形当中让食品的安全水平得到显著性的提高。基于此,本文将以此为话题,对食品安全检验检测体系现实问题进行分析,并在此基础上对解决的对策进行研究,以此对相关工作的开展发挥出良好的借鉴作用和价值。

北京生物立体库堆垛机故障问题研究 下载:281 浏览:2738

​郭俊云 王雪松 宋艺 《生物技术研究》 2021年11期

摘要:
在现代企业库房管理系统中,计算机控制堆垛机系统采用以“PLC+变频器+交流电动机”。从原材料入库,生产过程,成品入库,销售发货整个产品都由计算机全程管理。国药北京生物制品有限公司储运部安装的昆明船舶有限公司生产的TD1333系列巷道堆垛机系统,应用于库房入库,出库。做到每一个生产过程由系统控制。 昆船堆垛控制系统包括机械货叉,载货台,电气控制包括电控柜控制板,传感器。监控系统包括机上逻辑PLC.堆垛机可以满足多数自动化仓贮需求.不但具有全系列的通用型堆垛机,而且具有适应特殊存储需求的特殊堆垛机系统。在维修维保工作中引用故障树分析法系统分析故障原因,找出大概率故障,从源头解决问题,提高工作效率。
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