文章-世纪中文出版社

突变质粒CMV-3flag-hPROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的构建及表达下载：81 浏览：515

周晓涛1 周文涛2 彭震3 刘化蝶3 陈丹娜3 夏开德4 迪丽娜尔·波拉提1 赵云娟1 李家大3 《生物技术研究》 2018年7期

摘要:

构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)真核表达质粒并观察其蛋白表达。[方法]将NotⅠ的酶切位点(GCGGCCGCC)引入第一次PCR的后引物,扩增并突变h PROKR2的1-1035 bp(343YFK/AAA345),再将NotⅠ的酶切位点和3个连续甘氨酸突变碱基GCCGCCGCA引入第二次PCR的前引物扩增并突变h PROKR2的1036-1152bp(351HWR/AAA353),通过NotⅠ酶切位点连接前后两个片段,即可构建pc DNA3.1-h PROKR2-myc-his(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),最后通过测序鉴定突变是否成功。扩增h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),连接入CMV-3flag。Western Blot检测相应蛋白的表达。[结果]成功构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)质粒,并验证到相应蛋白表达。[结论]利用NotⅠ酶的碱基序列特性(GCGGCCGCC)进行3个连续氨基酸突变的方法简单有效。质粒CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的成功构建为后期进一步实验创造条件。

苏云金芽胞杆菌cyt2Ba16基因的克隆表达下载：481 浏览：493

关鹏1 秦培钢2 代小娟1 宋金东1 《生物技术研究》 2018年7期

摘要:

获得苏云金芽胞杆菌QL32-1中杀虫晶体蛋白基因,并分析其杀虫活性。[方法]采用cyt基因通用引物、两步法染色体步移的方法对QL32-1中cyt基因进行鉴定和全长克隆,再构建重组质粒pET-28a-2Ba16,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,最后对表达蛋白进行杀虫活性分析。[结果]克隆得到1个全长783 bp cyt2B基因,其编码260个氨基酸,推导分子量约29.69 kDa,此氨基酸序列与已知的Cyt2Ba1蛋白同源性最高,为92.4%。该基因被国际杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cyt2Ba16。杀虫活性分析表明:cyt2Ba16对双翅目的库蚊(Culex quinquefasciatus)具有显著的杀虫活性,LC50为9.73μg/mL。[结论]cyt2Ba16基因是一个对库蚊具有较高杀虫活性的新型cyt基因,为QL32-1菌株的应用提供理论基础。

线粒体转录终止因子2对人子宫颈癌HeLa细胞线粒体基因表达的影响下载：86 浏览：514

孙美涛1 梅雯1 王唯斯1 自加吉1 杨勇琴1 张晓娟2 余敏3 熊伟1 《生物技术研究》 2018年3期

摘要:

线粒体转录终止因子2(mitochondrial transcription termination factor 2,MTERF2)是通过比较血清饥饿与血清培养的人成纤维细胞基因表达谱差异发现的一个细胞增殖抑制基因。该研究旨在从复制、转录和翻译水平探讨线粒体转录终止因子2对人子宫颈癌He La细胞线粒体基因表达的影响。[方法]利用MTERF2过表达质粒和shRNA干扰表达质粒分别瞬时转染人子宫颈癌He La细胞,通过qRT-PCR检测目的基因MTERF2表达水平的变化。采用荧光定量PCR检测MTERF2对线粒体DNA拷贝量的影响,半定量RT-PCR检测MTERF2对线粒体基因转录水平的影响,Western Blot检测MTERF2线粒体DNA重链编码ND1、CO1蛋白和轻链编码ND6蛋白表达水平的影响。[结果]转染人子宫颈癌He La细胞48 h后,通过荧光定量PCR检测线粒体DNA拷贝量发现,过表达MTERF2基因对线粒体DNA的拷贝量具有显著抑制作用(P<0.05),而敲低MTERF2基因对线粒体DNA拷贝量的影响无显著差异(P>0.05);半定量RT-PCR和Western Blot检测发现,MTERF2基因的过表达会显著降低线粒体编码基因的mRNA水平和线粒体编码蛋白水平(P<0.05),而敲低MTERF2后线粒体转录和翻译水平略有下降,但无显著差异(P>0.05)。[结论]在人子宫颈癌He La细胞中过表达MTERF2显著抑制线粒体DNA的复制水平,并且显著下调线粒体编码基因的转录和翻译水平,而敲低MTERF2后线粒体基因的表达无显著变化。

翻转课堂在医学院校计算机公共课教学中的应用探索下载：95 浏览：504

高欣1 茹小光1 李建忠2 《软件工程研究》 2018年1期

摘要:

随着高等教育教学改革的不断深入,教学模式逐渐呈现出多元化发展的趋势,翻转课堂作为一种新型教学模式目前已逐步得到教师和学生的认可。计算机课程作为医学院校的公共基础课,根据医学教育的特点,设计合理的教学模式和教学方法,适应医学院校的教学要求,是医学计算机公共课教学改革的关键。本文以翻转课堂教学为研究内容,探讨医学院校计算机公共课程教学模式的改革,旨在为非计算机专业院校公共课教学提供一些思路和方法。

细胞如何适应外界变化的氧环境——解读2019年诺贝尔生理学或医学奖下载：77 浏览：473

陈子砚1 王予涵2 刘可可3 王月丹3 《生物学报》 2020年4期

摘要:

人的生命活动时刻离不开氧气,在低氧环境或者高氧环境中,机体不断对代谢过程进行调节,以适应环境。缺氧条件下,机体可产生促红细胞生成素(EPO),美国塞门扎教授发现了可对EPO基因转录进行调控的缺氧诱导因子(HIF)。但在正常氧气条件下,HIF1-α在细胞中几乎不存在,威廉·凯林发现了VHL蛋白通过给HIF-1α泛素化以调控其降解和代谢。凯林和拉特克利夫进而在HIF-1α的分子结构中发现了一个氧依赖性降解区(ODD),当氧气浓度较高时,这个部位可被VHL结合。有关此通路的研究临床价值极大,诺贝尔奖实至名归。

用氮掺杂碳点为荧光探针检测对羟基苯甲醛下载：32 浏览：343

弓辉张梦婷刘丹杨学芳卞伟《化学研究前沿》 2020年11期

摘要:

本文通过一步水热法,以菊花为原料,制备了氮掺杂碳点(N-CDs),并对N-CDs的粒径分布、元素组成、形貌结构及表面官能团进行了表征,考察了N-CDs的光谱性质。本实验基于PHBA有效猝灭N-CDs荧光的现象,以N-CDs为荧光探针,对PHBA进行了定量测定。结果显示该探针对PHBA的检测线性范围为10.0-150.0μM,检出限为63 nM。常见的离子、氨基酸和糖类对N-CDs检测PHBA基本无影响。同时,初步探讨了N-CDs与PHBA的反应机理主要为静态猝灭和内滤光效应。将该探针应用于健康人体血样和尿样中PHBA的微量测定。本实验为对羟基苯甲醛的检测提供了新的思路,也预示了该荧光探针在生物样品检测方面具有广阔的应用前景。

T细胞中的豪华轿车——CAR-T细胞下载：91 浏览：503

王月丹林怡婷《生物学报》 2018年3期

摘要:

CAR-T细胞是一种基因工程化T细胞,因其表面具有人工合成的、能直接识别肿瘤细胞特异性抗原的嵌合抗原受体——CAR而得名。CAR-T细胞识别抗原信号不需要抗原提呈细胞的加工和处理,也没有MHC的限制性,因此其抗肿瘤的应用范围更广。目前为止,CAR-T细胞可根据CAR的不同分为4代。随着CAR的设计和载体容量增加等生物医学技术的发展,其设计和应用更趋精准和完善,治疗的有效性和精准度不断提升。未来,CAR-T细胞作为一种新型微米"机器人",必将会在各种人类疾病的治疗中扮演越来越重要的精准微型"手术刀"的作用,造福于人类的生命与健康。

代谢标记小分子探针6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成下载：34 浏览：367

韩小见1 温银行2 郑路2 赵康康2 苏峰1 马静3 王佳佳2 《化学研究前沿》 2020年3期

摘要:

以乙酰氨基半乳糖为起始原料,经过叔丁基二甲基硅基对糖环的6位选择性保护,随后将1,3,4进行甲氧甲基保护,选择性脱除6位保护基,经Dess-Martin氧化、Bestmann′s试剂和酸性条件下去保护后得到目标化合物,并通过单晶衍射确定了中间体7的结构；本文为6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成提供了有效的制备方法,为后续相关生物学研究提供了基础。

类丹皮酚的结构修饰与在模拟体液中的稳定性考察和抗炎活性研究下载：34 浏览：358

胡丁旺1 方权辉2 彭永练3 林友文2 陈莉敏2 《化学研究前沿》 2019年10期

摘要:

丹皮酚、2-羟基-5-甲氧基-苯乙酮、3-羟基苯乙酮、2-羟基苯乙酮和2,4-二羟基苯乙酮先与1,4-二溴丁烷合成缩合物,再与酮洛芬合成系列目标化合物。用HPLC考察目标化合物在不同pH缓冲液中的降解情况,用二甲苯致小鼠耳肿胀模型对其进行抗炎活性筛选。合成了5个目标化合物,经MS和1H-NMR确证其结构。HPLC证明其在体内稳定。小鼠实验表明,目标化合物具有较强的抗炎作用。目标化合物在胃肠道pH值中稳定,抗炎活性较强,值得进一步研究。

类丹皮酚的结构修饰与在模拟体液中的稳定性考察和抗炎活性研究下载：22 浏览：239

胡丁旺1 方权辉2 彭永练3 林友文2 陈莉敏2 《化学研究前沿》 2019年9期

摘要:

丹皮酚、2-羟基-5-甲氧基-苯乙酮、3-羟基苯乙酮、2-羟基苯乙酮和2,4-二羟基苯乙酮先与1,4-二溴丁烷合成缩合物,再与酮洛芬合成系列目标化合物。用HPLC考察目标化合物在不同pH缓冲液中的降解情况,用二甲苯致小鼠耳肿胀模型对其进行抗炎活性筛选。合成了5个目标化合物,经MS和1H-NMR确证其结构。HPLC证明其在体内稳定。小鼠实验表明,目标化合物具有较强的抗炎作用。目标化合物在胃肠道pH值中稳定,抗炎活性较强,值得进一步研究。

高年龄和收缩压异常对肾功能早期损害的影响下载：46 浏览：342

马艺菲1 卓琳2 刘丁阳1 汪秀英3 卓朗1 《现代康复医学》 2020年12期

摘要:

目的探讨肾功能早期损害的影响因素,为控制慢性肾脏病,提高人群生命质量提供依据。方法采用回顾性研究方法,收集徐州市中心医院连续健康体检5次及以上且入组时肾功能正常者的资料,使用单因素分析、Logistic回归分析、综合人群归因危险度、中介效应和对应分析等方法探讨肾功能早期损害发生率及其影响因素。结果随访观察646人,年龄(49.92±15.00)岁,男性391人(60.53%),事业单位315人(48.76%),企业130人(20.12%),肾功能早期损害45人(6.97%)。单因素分析显示年龄、收缩压、舒张压、高密度脂蛋白、血糖和总胆固醇是肾功能早期损害的相关因素(P<0.05)。Logistic回归分析显示高年龄(OR=7.298, 95%CI=3.418～15.580)和高收缩压(OR=2.660, 95%CI=1.300～5.440)与肾功能早期损害正相关。综合人群归因危险度百分比(s PAR%)为64.4%,高年龄归因危险度百分比(PARc%)为21.1%,高收缩压PARc%为11.6%。高收缩压中介效应为11.7%(P<0.05)。对应分析显示年龄增高和收缩压升高与肾功能早期损害聚集性大。结论年龄、收缩压与肾功能早期损害密切相关,收缩压异常应当引起重视。

阿司匹林预防子痫前期的系统评价下载：58 浏览：404

郎琦1 黄波2 于祥远2 《预防医学杂志》 2020年8期

摘要:

目的系统评价妊娠期服用阿司匹林对子痫前期(Preeclampsia,PE)及其他妊娠和出生结局的影响。方法全面检索Pubmed、SpringerLink、Wiley Online Library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网(CNKI)和万方等数据库,获取截止至2018年11月有关妊娠期服用阿司匹林预防PE的文献,提取各研究观察指标中PE、妊娠高血压综合征(pregnancy induced hypertension syndrome,PIH)、宫内生长受限(intrauterine growth retardation,IUGR)、产后出血、围产儿死亡的数据,使用统计软件Stata12.0进行数据分析,P<0.05具有统计学意义。结果 24个临床随机对照试验(Randomized Controlled Trial,RCT)共14018例受试者纳入本研究,分析结果显示,女性妊娠期间服用阿司匹林,可显著降低PE的发病风险(合并效应的RR=0.77,95%CI=0.69～0.87,P<0.001)以及PIH的发病风险(合并效应的RR=0.37,95%CI=0.22～0.62,P<0.001);服用阿司匹林对其他妊娠和出生结局如IUGR、产后出血和围产儿死亡等均无显著影响(P>0.05)。结论妊娠期服用阿司匹林对PE和PIH具有预防作用。

新时期军校实施音乐教育的实践与理论思考下载：67 浏览：481

周春《当代音乐研究》 2019年9期

摘要:

音乐艺术在人类社会中具有不可替代的功能,美化人类的生存环境、满足人的感性需要;新时期军校音乐教育既是文化活动中最主要内容之一,也是培养优秀军事人才的重要手段;新时期我国的军校音乐教育在激发军人战斗精神、提高军人素质和任职能力发挥重要作用。

自动图像分析系统与快速流式细胞术在白细胞减少性疾病诊治中的价值下载：85 浏览：545

郭平1 陈骊婷1 廖兵2 王剑飚1 《国际检验医学》 2020年12期

摘要:

目的探讨自动图像分析系统与快速流式细胞术在白细胞减少性疾病诊治中的价值。方法分别采用自动图像分析系统、快速流式细胞术和显微镜镜检法对白细胞计数为(0.5～2.0)×10～9/L的181例患者进行白细胞分类计数。以显微镜镜检法为参考方法，比较上述方法白细胞分类计数的时间、精密度以及原始细胞检测相关性、敏感性与特异性。结果显微镜镜检法、快速流式细胞术、自动图像分析系统预分类和自动图像分析系统预分类+人工审核白细胞分类计数中位时间分别为864 s、277 s、190 s、364 s；快速流式细胞术中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和原始细胞分类计数结果的离散度优于其他3种方法。快速流式细胞术、自动图像分析系统预分类、自动图像分析系统预分类+人工审核检测原始细胞的敏感性和特异性分别为94.90%和98.80%、54.08%和74.69%、79.59%和100.00%，与显微镜镜检法的r值分别为0.937、0.507、0.990。结论自动图像分析系统+人工审核与快速流式细胞术可快速、准确地检测出低值白细胞样本中的原始细胞，对患者疾病的诊断、治疗及预后判断具有重要价值。

Diminazene对慢性脑低灌注大鼠脑内炎症反应影响及机制研究下载：81 浏览：491

陆俊玲1 薛晓1 段瑞2 张颖冬1 《神经科学研究》 2020年5期

摘要:

研究Diminazene(DIZE)对慢性脑低灌注(CCH)大鼠脑内炎症反应的影响及潜在机制。方法建立CCH大鼠模型,随机分为假手术组、CCH组、CCH+低剂量DIZE组(2 mg/kg)、CCH+高剂量DIZE组(10 mg/kg)。ELISA检测大鼠脑组织IL-1β、IL-12、IL-6、TNF-α、血管紧张素(Ang)-(1-7)的变化;PCR检测Mas受体(MasR)变化;通过比色试剂盒检测血管紧张素转化酶2(ACE2)活性的变化。结果与假手术组相比,CCH组脑组织IL-1β、IL-12、IL-6、TNF-α水平明显升高(均P<0.05),ACE2活性、MasR mRNA、Ang-(1-7)水平明显降低(均P<0.05)。与CCH组相比,低剂量及高剂量DIZE组ACE2活性、MasR mRNA、Ang-(1-7)水平显著升高(均P<0.05),低剂量及高剂量DIZE组炎症因子IL-6、IL-12、TNF-α水平及高剂量DIZE组IL-1β显著降低(均P<0.05)。除IL-12外,上述变化呈剂量依赖性,仅高剂量DIZE能够使炎症因子IL-1β降低(P<0.05)。结论 Diminazene可能通过激活脑内ACE2-Ang-(1-7)-MasR轴降低CCH大鼠脑内的炎症反应。

多种方法联合检测附红细胞体的应用下载：82 浏览：493

路凌怡1 王剑飚2 姚玉峰1 《国际检验医学》 2019年10期

摘要:

目的通过多种方法联合检测以提高人附红细胞体检测的特异性。方法选取223例血液病患者，分别用瑞氏-吉姆萨染色和吖啶橙荧光染色检测附红细胞体，比较2种方法的附红细胞体检出率。对2种方法检测结果均阳性的标本进行聚合酶链反应(PCR)检测，并对PCR检测结果阳性的标本进行基因测序和GenBank比对分析。结果瑞氏-吉姆萨染色附红细胞体的检出率为46.19%，吖啶橙荧光染色附红细胞体的检出率为28.25%。2种方法检测结果均阳性的40例标本中有10例PCR检测结果阳性，取其中1例条带较深的标本进行基因测序，测序结果与猪附红细胞体、牛附红细胞体和羊附红细胞体16S rRNA基因序列的同源性分别为95.84%、86.84%和87.33%。结论多种方法联合检测可提高附红细胞体检测的特异性。

香药概念探讨下载：42 浏览：250

王荣1 胡晓阳2 于斌1 万广宋1 《中医研究杂志》 2020年11期

摘要:

通过梳理香药的概念,分别阐述了香药与外来药、香药与芳香药等概念的区别与联系,明确了香药的概念应具有专属性,香药特指阿拉伯香药,是由阿拉伯商人经由陆上丝绸之路或海上丝绸之路从阿拉伯地区、非洲及东南亚等地贩运到中国的天然香料药物。并且指出香药的概念应兼具以下三个标准,其一,含有芳香挥发性成分;其二,医药保健常用之品,或可以配制香料并做为主要原料;其三,是古代丝绸之路上的重要商品,在沟通东西方贸易中起到了重要作用。

基于叶天士行医时期苏州温病的卫气营血辨证理论疾病基础探析下载：79 浏览：562

屠燕捷方肇勤杨爱东《当代中医药》 2018年12期

摘要:

叶天士所创温病卫气营血辨证理论对指导治疗当今临床具发热性质的感染性、传染性疾病具有重要意义。若能探知叶天士通过观察哪些疾病的发病规律获得这套理论,对于深入理解该理论内涵,准确运用于临床是有所裨益的。文章依据"实地调研法",通过走访苏州叶天士故居等处,收集相关史料,分析史料与叶天士医著记载,探究卫气营血理论形成期间叶天士辨治的主要温病病种,进而探讨叶天士卫气营血辨证理论于临床的适用病证,为感染病的中医辨治提供参考。

独活潜在功用的考察与分析下载：85 浏览：553

张丽艳梁茂新《当代中医药》 2018年12期

摘要:

目的：利用《普济方》数据库管理系统,结合文献考证和现代药理学研究与临床应用,挖掘和分析独活潜在功用,扩大临床应用范围。方法:分析《普济方》数据库管理系统含独活复方所治病证的分布和构成,同时考察历代本草记载的独活功用,并与2015年版《中华人民共和国药典》比较,发现古今功用主治的不同,挖掘和分析独活的潜在功用,结合现代药理学和临床应用加以佐证。结果:在《普济方》数据库中检索含独活复方1 619首,所治病证499个,分为26类,根据病证提炼功能,其中祛风除湿、止痛功能与2015年版《中华人民共和国药典》记载内容相吻合,但治疗中风、痈疽疮疡、痉病、瘙痒、惊悸、虚损、目赤肿痛等病证的功用未被收录。结合现代药理学研究和临床应用验证发现独活还具有平肝息风、解毒疗疮、安神定悸等功用。结论:通过数据分析、文献考证及现代药理学研究与临床应用的佐证,确认独活具有平肝息风、解毒疗疮、安神定悸的潜在功用。

中医阴阳并非朴素唯物主义下载：54 浏览：381

于珺1 吴伟洁2 《中医研究杂志》 2025年1期

摘要:

“阴阳是朴素唯物主义”是批评中医理论落后的最常见的论据，也是中医学教科书中常见的对阴阳概念及理论（以下简称“阴阳”）的界定，但这一界定缺乏对阴阳与朴素唯物主义的详细对比，应当进行反思。本文将依据《素问·阴阳应象大论》《素问·阴阳离合论》关于阴阳的记载，使用概念分析法对阴阳与朴素唯物主义进行详细对比，揭示阴阳与朴素唯物主义之间的差异从而揭示其中对中医阴阳的误解。

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