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黄鳍鲷肌肉中弹性蛋白酶基因全长克隆及生物信息学
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摘要:
研究表明弹性蛋白酶(elastase, Ela)参与调控嗜水气单胞菌引起的细菌性溃疡病,对控制鱼类养殖中免疫疾病有重要作用。本研究根据已报道脊椎动物的Elas基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得黄鳍鲷Ela基因(AlEla)cDNA序列全长,并对其进行生物信息学分析。结果显示,AlEla基因全长为946 bp,包含807 bp的开放阅读框,编码269个氨基酸,含有16个氨基酸信号肽的亲水性稳定膜外蛋白,定位于细胞外基质,具有3个O-糖基化和15个磷酸化的潜在位点。编码的成熟AlEla蛋白预测相对分子质量27 509 u,等电点为6.05。氨基酸序列同源性比对发现,AlEla与鲷和鲆的Elas2的同源性为84.76%~99.26%,处于系统进化树上同一分支,表明它们的亲缘性相近。AlEla具有Elas的保守结构,如Tryp-SPc结构域、丝氨酸蛋白酶催化三联体、保守的半胱氨酸残基以及在C端含有GDSGGPL序列等,揭示该酶有丝氨酸蛋白酶的催化活性。对AlEla蛋白的二级结构分析显示,α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规则卷曲所占的比例分别为17.84%、7.06%、24.54%和50.56%。三级结构分析推测α-螺旋和β-折叠对于AlEla蛋白的空间构象可能有着重要作用。本研究从黄鳍鲷肌肉中成功克隆AlEla基因并分析其生物信息学特征,为后续研究AlEla参与调控鱼类免疫疾病的机制提供理论基础。
土木工程施工技术中存在的问题与创新探究
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摘要:
现阶段,随着城市建设进程的加快,土木工程施工技术质量管理水平受到了更多关注,要积极整合技术管理方针,搭建更加完整的控制模式,维护土木工程的综合管理水平。提升土木工程施工技术质量管理工作具有重要的实践意义。一方面,优化土木工程施工技术质量管理水平能更好地满足企业施工技术管理要求,进一步发挥施工技术优势作用,共建良好的施工模型,以便于能搭建既全面又规范的控制体系,维护土木工程施工技术质量效果。另一方面,合理的施工技术质量管理内容能有效梳理施工流程,确保土木工程施工技术能严格依照规范标准逐步落实,从而更好地维护施工进度管理、成本管理等环节,减少干扰因素造成的影响,维护土木工程施工项目统筹管理水平。
物理教学中学生操作能力的培养探究
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