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南极磷虾主要过敏原的分离纯化及性质研究 下载：78 浏览：445

林娜1 马德蓉1，2 刘志东1 倪玲1 段蕊2 张俊杰2 《水产研究进展》 2022年5期

摘要:
为了探究南极磷虾致敏问题，从南极磷虾中筛选、鉴定、分离纯化其主要过敏原，并对过敏原的性质进行研究，实验通过缓冲盐溶液提取南极磷虾蛋白；采用SDS-PAGE和Western blot(WB)筛选南极磷虾过敏原；使用高效液相色谱-串联质谱鉴定过敏蛋白；通过等电点沉淀、硫酸铵盐析、阴离子交换柱层析分离纯化过敏原；采用SDS-PAGE及WB分析南极磷虾主要过敏原的耐热性及对模拟胃肠液的消化稳定性。结果显示，南极磷虾肌浆蛋白(SP)和肌原纤维蛋白(MF)电泳条带丰富且分子量范围广。南极磷虾蛋白与虾蟹过敏患者血清能发生免疫反应，其中至少有4个蛋白条带发生了阳性反应；免疫反应最强烈的蛋白分子量约为35ku，能够被所有的患者血清识别，经液质联用鉴定此过敏蛋白为南极磷虾原肌球蛋白(TM)。硫酸铵分级盐析纯化TM的最佳饱和度为50%；分离纯化后得到了纯度较高的TM，其等电点为4.4，热稳定性好，能与虾蟹过敏患者血清发生强烈的免疫反应。TM随着模拟胃液消化时间的延长，主条带分子量逐渐降低，最后稳定在33ku左右，并且分子量为15和12ku的降解片段含量逐渐增多且稳定存在；这些降解条带仍然能与过敏患者血清发生较强的免疫反应。随着模拟肠液消化时间的延长，TM原始片段逐渐减少直至消失，最后完全降解成分子量更小的多肽；TM经肠液消化后其降解产物免疫活性大大降低。研究表明，南极磷虾中存在过敏原，TM是其最主要的过敏原，且具有免疫反应性。TM还具备了过敏原的一般特性，比如耐高温、耐胃蛋白酶消化、对胰蛋白酶消化部分稳定。研究结果对于阐明南极磷虾潜在致敏问题的预警和防控具有现实意义，也为南极磷虾加工利用及过敏原消减技术构建提供基础信息。

脉冲喷射电沉积纳米结构镍涂层研究 下载：87 浏览：466

王东生 黄因慧 田宗军 刘志东 朱军 《纳米技术研究》 2023年2期

摘要:
采用脉冲喷射电沉积法在45钢基体表面制备了纳米结构镍涂层,研究了平均电流密度对涂层性能的影响.用扫描电镜和X射线衍射仪对涂层表面形貌和晶粒尺寸进行分析,并对涂层进行耐腐蚀性试验.结果表明,平均电流密度为39.8 A/dm2时涂层最致密,镍涂层平均晶粒尺寸最小,为13.7 nm;经过脉冲喷射电沉积后,耐腐蚀性能明显提高。

上课与“好玩”可兼得——初中体育利用主题教学法突破创新的尝试 下载：92 浏览：1013

刘志东 《教师教育与创新》 2023年4期

摘要:
随着素质教育政策和“阳光体育”号召的推行，体育科目越加备受重视，成为学业考试的重要科目。再从体育教学方法与模式上来看过去的体育课堂枯燥乏味，学生很难积极地参与其中，不仅身体素质得不到很好的发展，而且也对能力素质发展造成了很大的影响，因此需要教师改进教学方法，寻求突破创新。基于此通过查找相关资料，并且结合平时的教学经验，以主题教学法为例，对初中体育利用主题教学法突破创新的尝试这项研究主题展开论述，旨在通过论述为广大初中体育教师实现教学方法的创新目标提供一定的指导。
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