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应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系 下载:76 浏览:464

徐宏1 罗思凡2 罗思琛2 周颖欣2谷 夏斐2 康海仙2 《生物技术研究》 2019年11期

摘要:
探索应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系的筛选方法。[方法]EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切,T4 DNA连接酶连接构建目的基因p IRES2-EGFP表达载体并测序确定,Lipofectamine3000转染Hela细胞分为Mock组(未转染组)、NC组(p IRES2-EGFP空载对照组)、重组质粒转染组,转染后24 h消化细胞进行初步筛选(900μg/m LG418),转染后14~16 d将长至肉眼可见的细胞克隆全部重新消化进行二次筛选(方法同初步筛选),转染后28~32 d挑选3个肉眼可见的细胞克隆,实时荧光定量PCR和WB检测目的基因过表达效率。[结果]双酶切及测序确定重组质粒成功构建,与Mock组相比,NC组无明显变化,重组质粒转染组各克隆目的基因mRNA水平分别升高109±8. 3、127±10. 5、122±9. 1倍,P <0. 01,蛋白水平分别升高33±3. 3、45±4. 7、47±4. 9倍,P <0. 01。[结论]该筛选方法 28~32d左右可快速建立Hela细胞稳转细胞系,过表达效率高,可直接进行后续实验。

“人民教育家”高铭暄先生法学教育思想研究 下载:69 浏览:414

徐宏 《法学学报》 2020年3期

摘要:
高铭暄先生作为唯一全程参与新中国刑法立法工作的学者,是新中国刑法学和刑法学教育的主要奠基者和开拓者,为我国刑法学的人才培养和科学研究作出重大贡献。高铭暄先生在近七十年的教育生涯中,始终坚持马克思主义的立场、观点与方法,始终秉持法学教育的人民性,始终抱持改革创新的精神,一以贯之地注重理论与实践的紧密结合、历史和现实的共同关切、教学与科研的相互驱动,创造性地探索和发展了综述教学法、讨论教学法和案例教学法等具有前沿价值的教学方法,对中国特色社会主义法学教育理论体系的建立、发展和完善作出了开创性的贡献。

电机驱动系统开路故障诊断技术 下载:27 浏览:198

夏玲芳 周骏贵 马灿 徐宏艳 《电路系统研究》 2020年8期

摘要:
研究一种电机驱动系统的故障诊断新方法,能实时诊断与定位单个功率管或多个功率管的开路故障,在系统负载突变或转速突变时,不需要调整故障判断阈值,鲁棒性强,不易误诊断。

唐山市市区岩溶塌陷现状及影响因素分析 下载:67 浏览:491

田小伟 田俊花 徐宏斌 田双静 《地球科学探索》 2018年9期

摘要:
岩溶塌陷是唐山市市区重要的地质灾害,具有分布面积大、塌陷多发、隐患大的特点,严重威胁着城市建设和居民生活。本描述了城区岩溶塌陷的现状,并从地质环境条件、影响因素、形成机制、形成模式等多方位的分析了岩溶塌陷形成机理。

沧州地区地面沉降发展趋势与防治对策分析 下载:68 浏览:461

田小伟 田俊花 徐宏斌 田双静 《地球科学探索》 2018年9期

摘要:
地面沉降机理分析是目前研究地面沉降防治的热点问题。本文通过沧州地区地面沉降发展趋势与地下水位状况的对比,分析地下水位和地面沉降的相互关系,分析地面沉降发展规律,探讨地面沉降防治成效,为今后沧州地区地面沉降防治措施和对策的制定提供科学的理论依据。

车辆传动轴动态扭矩测量与数据预处理研究 下载:83 浏览:454

徐宜1 张国伟2 张洪彦1 徐宏2 乔丽1 张喜明1 《动力技术研究》 2018年6期

摘要:
为了解决车辆传动系统载荷谱测试过程中,转速高、扭矩大和温度变化范围广的环境中传动轴扭矩测量和数据传输困难的问题,研制了基于蓝牙4.0技术的车辆传动轴动态扭矩实时测量和无线传输测试系统.建立了传动轴动态扭矩信号预处理方法.在此基础之上,开展了实际车辆行驶过程中传动轴动态扭矩测试试验并且对数据进行了预处理.试验结果表明:在高转速等复杂工况下测试系统工作性能良好,能够准确地实时测量传动轴的动态扭矩;在信号预处理方面,箱线图法对异常值的去除有明显的效果.相对于小波分析通用阈值去噪方法,小波分析自适应阈值去噪对传动轴动态扭矩信号的去噪更具有针对性和准确性.

建构主义取向的家政人员开放学习设计 下载:59 浏览:405

徐宏卓 《中国教育学报》 2019年8期

摘要:
改革开放以来,家政人员的学习需求与职业发展需求日益旺盛,开放教育以其开放性为家政人员边工作边学习创造了条件,但目前学者对家政专业的教学研究较少。基于对建构主义学习理论的知识观、学习观、教师观和情境观的分析,家政人员的开放学习设计应强化对个体情境的关注、促成学习者知识之间的联结与交互、凸显学习过程的协作与学习成果的共生、体现工作场所的作用与学习评价的多元。在此基础上探索形成了家政人员开放学习设计的"四部曲"模式,即基于真实环境下的家政教学、实践基础上的整体知识建构、学习小组中的知识拓展与修正、多元化学习评价机制四个环节。经过教学实践与反思,该模式的后续应用需考虑学习者对建构主义学习设计的认同、小组讨论效果、教师角色定位以及学习者互评制度的执行等方面。

生理盐水注射速率对颈部血管CTA图像质量的影响 下载:81 浏览:493

徐宏亮1 励杨晟2 沈雯1 《心脑血管病研究》 2020年4期

摘要:
目的探讨不同生理盐水速率对头颈部血管CTA图像质量的影响。方法回顾性选取浙江省德清县人民医院2019年4月至2019年7月注射方案改变前后共40例病人作为研究对象。其中注射方案改变前(2019年4月至2019年5月)20例作为对照组,注射方案改变后(2019年6月至2019年7月)20例作为观察组。两组均经右肘正中静脉以5.0 mL/s的速度注入对比剂,注药量为(扫描时间+4 s)×注射速率,随后两组分别注入生理盐水50 mL,对照组速率为3.5 mL/s而观察组速率提高至5.0 mL/s。比较两组图像主动脉弓、两侧颈内动脉起始段、两侧颈内静脉(颈内动脉起始段层面)、两侧大脑中动脉起始段、基底动脉起始段及窦汇平均CT值,同时对AB两组的图像质量进行主观评分。结果对照组图像质量评分低于观察组,差异有统计学意义(t=-5.722,P <0.05)。对照组患者右侧锁骨下静脉残留对比剂所致伪影大,重建VR及MPR时右侧颈总动脉显示不清的图像较观察组多;观察组患者右侧锁骨下静脉残留对比剂所致伪影小,重建VR及MPR时图像显示清晰的图像较对照组多。结论提高生理盐水的速率能减少静脉硬束伪影,提高颈部血管CTA图像质量。

舞蹈怎样更好的融入高中体育课堂 下载:20 浏览:215

徐宏宇 《当代中文学刊》 2025年3期

摘要:
随着教育改革的深入,越来越多的教育工作者开始关注如何更好地将艺术教育融入日常教学中。舞蹈作为一种独特的艺术形式,具有锻炼身体、培养气质、陶冶情操等多重功能。因此,将舞蹈融入高中体育课堂,不仅可以提高学生的身体素质,还能培养他们的审美能力和团队协作精神。本文将从舞蹈融入高中体育课堂的重要性、实施过程中的问题及对策等方面展开论述。

对石油水平井生产测井仪器输送工艺的研究 下载:70 浏览:717

蔡恒亮 米硕 徐宏科 郭永红 《中国仪器》 2024年1期

摘要:
水平井生产测井仪器输送工艺是一项较为复杂的工作,其不仅要求施工人员要具备较强的专业技能,同时还要求相关人员具备较强的责任心,只有这样才能够保证施工的顺利进行。基于此,本文将对石油水平井生产测井仪器输送工艺进行研究。

基于机舱式激光雷达的风电机组偏航校准研究 下载:193 浏览:1952

徐宏 《电气学报》 2022年10期

摘要:
偏航系统是风电机组的重要组成部分,对于风电机组的发电性能以及安全性至关重要,测风装置在机舱尾部,受风轮扰动及机舱外形的影响,不能准确测量风速与风向。对此,本文基于贝茨理论,提出了一种利用测风激光雷达对风电机组的偏航误差进行了测试分析,并给出了相关建议及结论。

高强混凝土在城市道路与交通工程中的实践应用 下载:193 浏览:2361

徐宏亮 《交通技术研究》 2021年11期

摘要:
在城市基础设施建设工作不断推进的当下,人们对道路交通使用安全的关注度更高。在实际研究如何提升道路与交通工程施工质量时,技术人员应着重意识到高强混凝土的使用价值。而笔者主要结合某地区的一次工程施工实际案例,介绍高强混凝土的实践应用流程。并通过总结各地以往的施工经验,分析常见的施工问题,着重研究相应的解决对策,以此来为行车安全提供基础保障。

环保工程中关于污水处理技术的研究与讨论 下载:124 浏览:1555

徐宏俊 《工程与技术研究》 2023年8期

摘要:
随着社会的进步,环境保护工程受到越来越多的重视,但是,传统的污水处理技术已经不能满足当前的需求,因此,有关机构必须采取有效措施,建立先进的污水处理机制,明确各部门的职责,提升污水处理的质量和效率,充分利用相关技术,以实现预期的管理目标。
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