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利妥昔单克隆抗体局部注射联合甲基强地松龙治疗甲状腺相关性眼病的临床疗效分析 下载：53 浏览：363

王萍 张少波 张琼 李养军 《中国眼科杂志》 2020年6期

摘要:
目的探讨眶内局部注射利妥昔单克隆抗体联合全身应用甲基强地松龙治疗甲状腺相关性眼病(TAO)的临床效果。方法回顾性分析2017年3月至2019年4月就诊于我院的中、重度活动期TAO患者107例。入院后完善相关检查，并进行临床活动性(CAS)评分。给予全身甲基强地松龙静滴治疗，500 mg/周，共6周，后减量为250 mg/周，共6周；同时给予眼眶内注射利妥昔单克隆抗体注射液20 mg，1次/周，共8周。治疗期间及治疗后，详细记录CAS评分。随访3～25个月，平均13.2个月。结果完成全部疗程的患者共89例(男性45例，女性44例)，平均年龄34.7岁(17～76岁)。治疗前CAS平均7.4分(7～9分)；治疗第3周后平均CAS评分5.5分，有效率85%；治疗结束后，CAS评分平均2.9分，有效率90.3%。10%的患者在治疗结束后3个月内病情逐渐转为非活动期。其中3例(5只眼)行眶减压手术的患者，术后平均3.1个月病情复发，单独眶内注射利妥昔单克隆抗体8周，病情完全控制。55%的患者除首次注射后有轻度低热的不良反应外，其余患者均未见异常。随访至今，所有患者病情未见复发。结论利妥昔单克隆抗体抗局部注射联合全身应用甲基强地松龙更能提高中、重度TAO的治愈率，减少病情复发，甚至对眶减压术后复发的患者有良好的效果。

人肺炎链球菌快速检测胶体金试纸的研制 下载：86 浏览：489

李杰1 程雨洁1 宋慧茹1 任萌1 王毅1,2,3 杨波1,2,3 胡征1,2,3 《生物技术研究》 2020年1期

摘要:
研制一种快速检测人肺炎链球菌(S. pneumoniae)的免疫胶体金层析试纸。[方法]对肺炎链球菌表面蛋白A(pneumococcal surface protein A,PspA)基因序列(Gen Bank:U89711)作生物信息学分析,选取抗原表位强、种内同源性高的片段克隆表达纯化重组蛋白rPspA,并免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体;以双抗夹心法制备胶体金免疫层析试纸,并对其特异性、灵敏度以及稳定性进行验证分析。[结果]制备的胶体金试纸对rPspA最低检测限达到0. 1pg/m L,可在15min内完成对肺炎链球菌的检测,与其他10种重要呼吸道病原菌无交叉反应;试纸条在25℃条件下保存6个月仍具有良好的重复性和稳定性。[结论]PspA蛋白具有高度的表面暴露性和较强的抗原性,可作为Sp的检测标志物,以其抗体为基础制备的胶体金免疫层析试纸,适用于Sp菌感染的临床快速检测。

重组人源化抗PD-1单克隆抗体注射液Ⅰ期临床试验的综合护理对策 下载：52 浏览：491

曾顺菲 崔岩 张望解 文君 刘荣佳 《护理研究杂志》 2020年8期

摘要:
分析12例PD-1受试者的临床资料,结合国内外文献,分享和讨论临床试验工作中使用PD-1患者的护理经验与体会。

异育银鲫IgM单克隆抗体的制备及其应用 下载：57 浏览：311

郭宝琴1,2 魏畅1 王轶南1 李强1 《中国水产学报》 2022年6期

摘要:
为制备抗异育银鲫Carassius auratus gibelio IgM单克隆抗体，以单克隆抗体为工具构建鲫血清中鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)特异性抗体酶联免疫检测技术，运用硫酸铵盐析结合Protein A亲和层析法，从异育银鲫血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM。结果表明：经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示，纯化的血清IgM主要有两条蛋白带，相对分子质量分别为82 000和25 000,分别为异育银鲫IgM的重链和轻链；以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术获得了5株抗异育银鲫IgM单克隆抗体，分别命名为8G1、7C6、8C2、8C5和5C2;抗体分型结果显示，8G1、8C2、8C5和5C2均为IgG1亚型，7C6为IgG2b亚型；免疫印迹分析显示，5株单抗均可特异性识别相对分子质量为25 000的IgM轻链分子；间接免疫荧光分析显示，5株单抗均可与异育银鲫脾脏中部分白细胞发生特异性结合，阳性细胞表面呈现绿色点状荧光信号；用鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)病毒粒子包被酶标板，以抗异育银鲫IgM单抗作为检测一抗，碱性磷酸酶标记羊抗鼠Ig作为检测二抗，构建了鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术，进一步优化显示，该技术中最佳单抗为8C5,最佳二抗稀释度为1∶2 000,鲫血清最佳稀释度为1∶20。研究表明，本研究中成功制备了抗异育银鲫IgM单克隆抗体，并以此为工具构建了检测鲫血清中CyHV-2特异性抗体酶联免疫检测技术，研究结果可为今后开展异育银鲫特异性免疫应答研究及CyHV-2疫苗效果评价提供科学参考。

HPA-1a、HPA-3a、HPA-5b抗体MAIPA定量检测方法的建立 下载：95 浏览：507

李睿书 凌冰 陆萍 《国际检验医学》 2018年2期

摘要:
目的分别建立针对人类血小板抗原（HPA）-1a、HPA-3a、HPA-5b 3种抗体的定量血小板（PLT）抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测（MAIPA）方法。方法采用MAIPA方法检测不同浓度的标准或参比HPA-1a、HPA-3a、HPA-5b抗血清，优化实验条件，在检测范围内绘制线性曲线，并分别分析其敏感性、特异性、准确性和精密度。结果针对HPA-1a、HPA-3a、HPA-5b 3种抗体的MAIPA定量检测方法得到了优化，检测范围分别为0～4 IU、0～20 AU、0～20 AU，准确性（回收率）分别为96.20%103.10%、97.90%103.10%、100.20%106.10%。批内精密度[变异系数（CV）]分别为1.3%3.6%、2.7%5.2%和4.7%5.3%，批间精密度（CV）分别为4.0%5.6%、4.4%5.9%和3.2%6.3%，检测人源抗体抗A、抗B、抗I、抗P均无明显阳性，具有良好的特异性。结论建立的针对HPA-1a、HPA-3a、HPA-5b抗体的MAIPA定量检测体系均具有较高的敏感度、特异度、准确度和精密度，对于临床相关疾病的诊断和PLT安全输注具有重要的应用价值。

栀子苷单克隆抗体的制备与鉴定 下载：68 浏览：509

张海霞1 尹湘君1 刘姝伶1 程发峰1 王庆国1 于才2 魏玮3 王雪茜1 《中医研究杂志》 2019年4期

摘要:
目的:制备特异性的栀子苷(Geniposide,GEN)单克隆抗体。方法:采用高碘酸钠氧化法合成栀子苷免疫抗原,通过对BALB/c小鼠进行免疫;对血清进行检测阳性后,取上述免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0-Ag14按10∶1的比例融合;用间接竞争ELISA法和有限稀释法进行单克隆杂交瘤细胞的筛选;用阳性细胞株诱导制备腹水抗体;用辛酸硫酸铵法纯化抗体,并进行交叉反应检测。选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌栀子苷单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备栀子苷单克隆抗体,并通过正辛酸纯化的方法纯化腹水中抗体蛋白,采用SDS-PAGE法对抗体蛋白的纯化纯度进行检测。结果:获得了能分泌抗栀子苷单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞株。SDS-PAGE结果说明经过纯化腹水中大量的杂蛋白能够被除去,获得的栀子单克隆抗体纯度较高,纯化后腹水中抗体效价与纯化前比均为60 000∶1左右。结论:成功获得了能分泌栀子苷单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞株,特异性、灵敏度都比较高,为样品中的栀子苷快速微量检测及免疫亲和色谱柱的制备奠定了基础。

单克隆抗体制备之细胞融合虚拟仿真实验的设计与实践 下载：145 浏览：820

范丽颖 《建模与系统仿真》 2024年12期

摘要:
为了强化本科教育教学的数字化建设，探究在实体实验的基础上，构建与传统实验课程功能互补、内容拓展的细胞生物学虚拟仿真实验教学模式，选取了单克隆抗体制备过程中的细胞融合作为虚拟实验内容，设计了4个模块20个实验操作步骤，实验部分包括练习模式和考核模式，完成实验操作考核后会自动生成学生的每一步骤的得分和总成绩考核报告。该实验在生物工程、生物技术 3年级本科生试行虚实结合实验教学模式，线上与线下教学有机结合，有效提高了学生的自主学习兴趣、思维能力和实践能力，有利于提升人才培养质量和教学效果。
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