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母源因子boule在光棘球海胆性腺中的表达与定位 下载：63 浏览：366

韩亚伦 魏金亮 崔洲平 张健 张伟杰 温斌 常亚青 孙志惠 《中国水产学报》 2021年3期

摘要:
为鉴定光棘球海胆Mesocentrotus nudus生殖细胞标记基因,通过基因克隆、荧光定量PCR及切片原位杂交等技术分析了光棘球海胆(湿体质量为76.8g±10.0g)母源因子(boule)基因的分子特征及动态表达模式。结果表明:光棘球海胆boule cDNA序列全长为1788bp,其中,3′非编码区为601bp, 5′非编码区为146bp,开放阅读框(open reading frame, ORF)为1041bp,共编码346个氨基酸,包含一个保守的RRM结构域;荧光定量PCR结果显示,boule为母源因子,在整个胚胎发育时期均有表达;boule基因在处于生长期(stageⅡ)光棘球海胆的肠、管足、体腔液和性腺中均有表达,其中,boule基因在精巢表达量最高(P<0.05);在卵巢中表达量随卵母细胞的成熟而逐渐升高,在成熟期(stageⅣ)卵巢中达到最高,精巢中表达量仅在生长期(stageⅡ)及成熟前期(stageⅢ)有较高表达;切片原位杂交显示,boule基因在光棘球海胆精巢的生殖细胞中特异表达,卵巢中未检测到阳性细胞信号。研究表明,光棘球海胆boule基因是雄性生殖细胞标记基因,本研究结果可为海胆雄性生殖细胞发育相关研究提供数据资料。

中华鳖dazl基因克隆及在生殖细胞中的表达 下载：90 浏览：510

唐舟凯1 张飘逸2 储张杰1 朱新平1，2 李伟2 吴栩灵2 徐红艳1，2 《水产研究进展》 2019年4期

摘要:
为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制，实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段，长1 007 bp，其中包括5′端非编码区197 bp，3′端非编码区33 bp，开放阅读框777 bp，编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高，达96%；与小鼠Dazl同源性达75%。荧光定量PCR分析结果显示，中华鳖dazl mRNA主要在精巢和卵巢中表达，在体细胞组织中仅检测到微量表达。冰冻切片原位杂交结果显示，中华鳖dazl mRNA在生殖细胞中特异表达，且在不同时期的生殖细胞中呈动态表达模式。在精巢中，中华鳖dazl mRNA在初级和次级精母细胞中表达最强，在精原干细胞中表达水平次之，在精子细胞中未检测到信号；在卵巢中，中华鳖dazl mRNA信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布且在最早期的初级卵母细胞中信号最强，随着卵母细胞的增大，信号逐渐聚集并逐渐减弱。研究表明，dazl基因可能对中华鳖两性生殖细胞的发生具有重要的调控作用。
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