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凡纳滨对虾肠道中地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其生物学特性
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摘要:
为筛选对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)具有潜在益生效果的菌株,从体质量为(3.1±0.4)g的健康凡纳滨对虾肠道中筛选出一株具有耐高温(80℃)能力的菌株(命名为RHVJ),采用形态学观察、生理生化鉴定、基因序列比对、病原菌拮抗能力测定、安全性与耐受性分析和生长特性检测等方法对其展开研究。结果表明:菌株RHVJ为革兰氏阳性杆菌,综合其生理生化特征可初步鉴定该菌属于芽孢杆菌属(Bacillus);菌株RHVJ的16S rDNA序列与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的MH305331.1和NR074923.1完全匹配,其gyrB序列与CP038186.1和CP023729.1也达到了100%的一致性;综合菌体形态、生理生化及分子生物学特征,判定菌株RHVJ为地衣芽孢杆菌;地衣芽孢杆菌RHVJ可抑制副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)生长,对凡纳滨对虾无致病性;在胆盐质量浓度为0~1.2g/L、pH为3~11环境下培养,以及在37~90℃下进行5min或15min水浴处理后,菌株RHVJ仍可持续增殖,该菌在27℃、pH7和盐度20条件下生长最佳。研究表明,凡纳滨对虾肠道源地衣芽孢杆菌RHVJ环境适应性良好且安全,具有一定的病原菌拮抗能力,可作为候选菌株开发为益生菌制剂。
南极磷虾主要过敏原的分离纯化及性质研究
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摘要:
为了探究南极磷虾致敏问题,从南极磷虾中筛选、鉴定、分离纯化其主要过敏原,并对过敏原的性质进行研究,实验通过缓冲盐溶液提取南极磷虾蛋白;采用SDS-PAGE和Western blot(WB)筛选南极磷虾过敏原;使用高效液相色谱-串联质谱鉴定过敏蛋白;通过等电点沉淀、硫酸铵盐析、阴离子交换柱层析分离纯化过敏原;采用SDS-PAGE及WB分析南极磷虾主要过敏原的耐热性及对模拟胃肠液的消化稳定性。结果显示,南极磷虾肌浆蛋白(SP)和肌原纤维蛋白(MF)电泳条带丰富且分子量范围广。南极磷虾蛋白与虾蟹过敏患者血清能发生免疫反应,其中至少有4个蛋白条带发生了阳性反应;免疫反应最强烈的蛋白分子量约为35ku,能够被所有的患者血清识别,经液质联用鉴定此过敏蛋白为南极磷虾原肌球蛋白(TM)。硫酸铵分级盐析纯化TM的最佳饱和度为50%;分离纯化后得到了纯度较高的TM,其等电点为4.4,热稳定性好,能与虾蟹过敏患者血清发生强烈的免疫反应。TM随着模拟胃液消化时间的延长,主条带分子量逐渐降低,最后稳定在33ku左右,并且分子量为15和12ku的降解片段含量逐渐增多且稳定存在;这些降解条带仍然能与过敏患者血清发生较强的免疫反应。随着模拟肠液消化时间的延长,TM原始片段逐渐减少直至消失,最后完全降解成分子量更小的多肽;TM经肠液消化后其降解产物免疫活性大大降低。研究表明,南极磷虾中存在过敏原,TM是其最主要的过敏原,且具有免疫反应性。TM还具备了过敏原的一般特性,比如耐高温、耐胃蛋白酶消化、对胰蛋白酶消化部分稳定。研究结果对于阐明南极磷虾潜在致敏问题的预警和防控具有现实意义,也为南极磷虾加工利用及过敏原消减技术构建提供基础信息。
基于改进YOLO v7的微藻轻量级检测方法
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摘要:
为了解决传统的微藻检测方法依赖于复杂的设备和大量的人工操作,不仅耗时长且检测结果易受检测人员技术经验影响等问题,结合微藻显微图像特征,采用K-means++算法聚类锚框,并基于YOLO v7模型,提出一种轻量级实时检测微藻的方法YOLO v7-MA。该方法将GhostNet引入YOLO v7模型中作为主干特征提取网络,以减少网络的参数量,同时将特征融合网络中的普通卷积块替换为深度可分离卷积块,进一步降低模型的计算复杂度,并在特征融合网络中加入CBAM注意力模块,以提高网络的特征表达能力。结果表明:在14种微藻数据集上的试验显示,本研究中提出的YOLO v7-MA模型的平均精度均值为98.56%,召回率为96.88%,F1值为97.42%,参数量为22.64×10~6,浮点运算次数(FLOPs)为38.45×10~9;相较于YOLO v7模型,YOLO v7-MA模型平均精度均值提高了0.95%,召回率和F1值分别提高了1.15%、0.23%,参数量和FLOPs分别降低了14.63%和66.55%;相较于FasterRCNN-VGG16、FasterRCNN-Resnet50、YOLO v4、YOLO v4-Mobilenet v3、YOLO v4-VGG16、YOLO v4-Resnet50和YOLO v5s等模型,YOLO v7-MA模型的平均精度均值也均有提高,参数量均有减少。研究表明,YOLO v7-MA模型能够为微藻的识别分类提供一种轻量化的实时高效检测方法,大大降低了检测人员的工作量。
黑斑蛙蝌蚪出血病病原菌的分离鉴定及药物敏感性
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摘要:
为确定黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌并筛选出防治该病的药物,本研究从患出血病蝌蚪体内分离出菌株KD-CXB-1,健康蝌蚪在人工感染该菌后出现与自然感染蝌蚪相似的出血症状。同时从人工感染死亡蝌蚪体内分离到与菌株KD-CXB-1形态特征及生理生化特性一致的优势菌株,以上结果表明KD-CXB-1为黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌。实验进一步对菌株KD-CXB-1开展形态学观察、革兰氏染色、生理生化指标测定、16S rDNA基因序列测定、系统发育树构建、药物敏感性测定。形态学观察显示该菌为杆状的革兰氏阴性菌,长度约1μm,表面粗糙。通过16S rDNA基因序列比对、系统发育树构建、生理生化实验确定KD-CXB-1为嗜水气单胞菌。药物敏感性实验结果表明,KD-CXB-1对氟苯尼考、丁香和苏木等10种药物高度敏感;对乌梅、五倍子和黄芩等3种药物中度敏感;对阿莫西林、大黄和青霉素等8种药物不敏感。研究表明,嗜水气单胞菌是引起黑斑蛙蝌蚪出血病的病原菌,筛选出的10种高敏感药物为有效防治蝌蚪出血病提供了理论参考和实践依据。
铜藻褐藻聚糖硫酸酯的分离纯化、结构组成及保肝护肝作用
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摘要:
为研究铜藻褐藻聚糖硫酸酯的结构组成及保肝护肝作用,以铜藻Sargassum horneri褐藻聚糖硫酸酯(fucoidan)粗品为原料,经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分离纯化,采用高效液相色谱及红外光谱对粗多糖(TF)及其纯化组分的单糖组成和结构特征进行分析,并建立CCl4诱导的肝脏损伤动物模型,进行各组分的保肝作用试验。结果表明:从铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品分离纯化得到TF1、TF2、TF3、TF4 4个组分,其硫酸基团含量分别为9.62%、11.51%、14.51%和13.62%;单糖组成分析显示,粗多糖主要由岩藻糖(Fuc)、葡萄糖(Glu)、甘露糖(Man)和半乳糖(Gal)组成,各纯化组分的单糖组成含量差异较大;红外光谱分析显示,TF及其纯化组分在1 250 cm-1附近出现强吸收峰,为S=O(硫酸基)的吸收峰,证明TF及其纯化组分均含有硫酸基团,且TF、TF3、TF4的硫酸基主要连接于岩藻糖的C-2或C-3位置,TF1、TF2主要连接于岩藻糖的C-4位置;动物试验显示,灌胃不同剂量TF及其纯化组分,均能显著提高肝损伤小鼠肝脏或血清中SOD、GSH-Px和TNF-α的活性(P<0.05),显著降低MDA、ALT和AST指标的水平(P<0.05),肝组织切片显示,肝细胞病变程度较模型组明显减轻。研究表明,铜藻褐藻聚糖硫酸酯粗品经分离纯化得到4个组分,总体上具有显著的抗氧化和保肝护肝作用。
3种宿主源盾纤毛虫的分离鉴定及体外培养研究
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摘要:
为进一步鉴定和体外培养引起养殖海水鱼类和棘皮动物体表溃烂的致病性盾纤毛虫,分别从辽宁地区养殖的患病刺参Apostichopus japonicus、红鳍东方鲀Takifugu rubripes和大菱鲆Scophthalmus maximus的体表分离出3种盾纤毛虫,采用活体观察、甲醛固定观察、扫描电镜观察、醋酸洋红染色及甲基绿派洛宁染色的方法,对3种盾纤毛虫的形态特征进行分析;采用PCR技术获得其18S rDNA基因序列,并与同源序列进行比对及构建系统发育树;选用L-15、MEM和RPMI1640培养基,在相同培养条件下培养7d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小;采用盾纤毛虫最适培养基,在不同的温度(10、15、20、30℃)、盐度(13、20、30、40)、pH(4.2、5.2、7.2、9.2)条件下培养7d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小。结果表明:从刺参和红鳍东方鲀体表分离出的盾纤毛虫形态均与尾丝虫Uronema sp.相似,且18S rDNA序列与尾丝虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与尾丝虫聚为一支;从大菱鲆体表分离出的盾纤毛虫形态与伪康纤虫Pseudocohnilembus sp.相似,且18S rDNA序列与伪康纤虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与伪康纤虫聚为一支;体外最适培养基筛选结果显示,L-15培养基培养的盾纤毛虫种群密度高于MEM和RPMI1640培养基;体外培养条件试验结果显示,推荐体外培养条件为温度20℃、盐度30、pH 7.2。本研究结果可为海水养殖动物体表溃烂病原盾纤毛虫的分离鉴定及基于盾纤毛虫全虫疫苗研制的体外培养条件优化提供参考。
中华草龟腐皮裂甲病病原的分离鉴定和组织病理学研究
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摘要:
为诊断中华草龟Chinemys reevesiis腹甲腐皮裂甲病,于江西省南昌市某养龟场采集种龟池患病和濒死的中华草龟种龟11只(编号为1~11号),采用病原菌分离纯化、生理生化试验、疑似病原菌人工回感试验、病原菌药敏试验、组织病理检验等方法进行了病因分析及鉴定。结果表明:该病典型的临床症状为腹甲角质层干裂、骨质层发黑,病龟精神状态均表现呆滞、不爱爬动;病理解剖显示,患病龟肝脏发黑,肺发白,胃肠道无内容物、有腹水,内脏团伴有恶臭味;组织病理观察显示,多数病龟密质骨发生裂解坏死,骨髓腔浸润大量嗜酸性粒细胞,同时内脏组织有炎症特征;进一步从病龟腹甲、肝脏、肺组织分离获得5株菌株,经细菌形态学观察、生理生化试验、16S rDNA基因序列及系统发育分析等鉴定为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila;人工回感染试验显示,感染龟与自然发病龟的临床症状一致,且在回感中华草龟脏器中再分离到相同的菌株;药敏试验显示,该菌对头孢类、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、喹诺酮类抗菌药物高度敏感,对青霉素类、四环素抗菌类药物有耐药性。研究表明,中华草龟腐皮裂甲病的病原菌是嗜水气单胞菌,头孢类、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、喹诺酮类等抗菌药物可作为该病临床防治的首选药品。
基于埃洛石纳米管的CO2分离膜的制备
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摘要:
随着工业的发展和人口的增加,大气中CO2的含量不断增加,本论文以解决CO2捕集与封存问题为出发点,制备一系列用于CO2分离的复合膜。本实验为制备可以控制载体数量的促进载体膜,利用反向原子转移自由基聚合反应(RATRP)将聚4-乙烯基吡啶(P4VP)负载在埃洛石纳米管(HNTs)上,然后将其作为添加剂制备聚砜(PS)混合基质膜,以提高膜对CO2的选择性。在实验过程中我们为防止孔渗现象,在PS基膜表面涂两层的聚二甲基硅氧烷(PDMS),进行堵孔处理,使得材料有疏水的自保护涂层。我们又在膜的表面涂覆了一层多巴胺(DA)和聚乙烯亚胺(PEI)溶液来改善膜的亲水性,便于后面进行铸膜液的涂覆。结合上述实验思路,我们做出了具备在一定含量范围内CO2和N2的渗透率及CO2/N2分离因子的混合基质膜。
电梯检验检测分离存在的问题研究
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改进基于“导、演、评”分离的实兵演习检验评估模式研究
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油气储运中油气回收技术的应用研究
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天然气提氦无机分离膜研究
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钢铁冶金用废渣分离装置运用浅析
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锅炉煤炭热效率及其影响因素探析
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超声乳化白内障吸除术加房角分离术对原发性闭角型青光眼合并白内障患者的效果分析
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摘要:
目的:分析超声乳化白内障吸除术加房角分离术对原发性闭角型青光眼合并白内障患者的效果。方法:选取于2021年8月-2022年9月期间到本院接受诊治的原发性闭角型青光眼合并白内障患者作为样本来进行本次研究,样本例数60例,在单双号分发法指导下将这60例患者进行分组,其中30例单号患者为常规组,组内患者采用超声乳化白内障吸除术联合小梁切除术治疗,另外30例双号患者为研究组,组内患者采用超声乳化白内障吸除术联合房角分离术治疗,并对两组患者的临床治疗效果、并发症发生情况、临床指标、治疗满意度、角膜内皮相关指标以及生活质量等指标进行对比分析。结果:两组青光眼合并白内障患者临床治疗效果区别对比,研究组患者的临床治疗总有效率高于常规组(P<0.05);两组青光眼合并白内障患者并发症发生情况区别对比,研究组患者的并发症发生率低于常规组(P<0.05);两组青光眼合并白内障患者临床指标区别对比,研究组患者的各项临床指标均优于常规组(P<0.05);两组青光眼合并白内障患者治疗满意度区别对比,研究组患者的治疗满意度高于常规组(P<0.05);两组青光眼合并白内障患者角膜内皮指标区别对比,研究组患者的角膜内皮指标明显优于常规组(P<0.05);两组青光眼合并白内障患者生活质量区别对比,研究组患者的生活质量明显高于常规组(P<0.05)。结论:对于原发性闭角型青光眼合并白内障患者来说,应采用超声乳化白内障吸除术联合房角分离术进行治疗,这种治疗方式可以有效改善患者生活质量、角膜内皮指标以及各项临床指标,并降低患者并发症发生率,提升患者治疗满意度以及临床治疗效果,应用效果十分显著。
核电厂汽水分离再热器常见缺陷原因分析及处理
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微滤膜分离技术用于微生物检验的效果评价
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探讨微滤膜分离技术在疾控中心微生物检验中的应用
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摘要:
目的:分析和研究微滤膜分离技术在疾控中心微生物检验中的应用价值。方法:所选病例是2021年1月到2023年1月疾控中心接入的阳性微生物待检样本180例,随机分为两组,常规检测组和特殊检测组,各为90例;常规检测组予以常规平板培养法检测,特殊检测组用以微滤膜分离技术检测,分析两种检测方式的微生物检出率、检测灵敏度、污染率和检测时间。结果:特殊检测组微生物检出率为95.56%,检测灵敏度为97.78%,污染率为2.22%;常规检测组微生物检出率为77.78%,检测灵敏度为87.78%,污染率为11.11%;特殊检测组微生物检出率、检测灵敏度比常规检测组更高,数据有差异(P<0.05);特殊检测组污染率比常规检测组偏低,数据有差异(P<0.05);特殊检测组检测时间为(5.31±0.89)h,常规检测组为(29.56±5.27)h,特殊检测组检测时间更短于常规检测组,数据有差异(P<0.05)。结论:将微滤膜分离技术应用于疾控中心微生物检验中,能够获得准确的检测结果,提升检测灵敏度,减少培养微生物过程中出现的污染,同时检测的时间比较短,值得进行推广和应用。
一种用于分离式导弹的天地信号传输系统设计
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摘要:
目前国内研制成功的防空导弹发射后均为不分离状态,不分离的防空导弹通过导弹尾端面收发天线实现飞行过程的信号传输。对于新研制的分离式导弹,若收发天线还安装在导弹一级尾端面,一旦尾端面收发天线随一级弹体分离坠毁,导弹与地面的信号传输就会中断、使导弹失去控制。因此,传统单靠导弹尾端面收发天线的天地信号传输系统不能满足分离式防空导弹的需求。若不能实现导弹一、二级分离前、后天地信号的无障碍传输,就不能实现对导弹全飞行过程的控制。对于高速、高加速导弹来说,就不能尽早完成截获,对武器系统的作战空域、杀伤区近界的性能指标产生不利影响。为解决上述技术问题,本文提出了一种用于分离式导弹的天地信号传输系统,该系统能保证导弹一、二级分离前、后天地信号的无障碍传输。