文章-世纪中文出版社

利妥昔单克隆抗体局部注射联合甲基强地松龙治疗甲状腺相关性眼病的临床疗效分析下载：53 浏览：349

王萍张少波张琼李养军《中国眼科杂志》 2020年6期

摘要:

目的探讨眶内局部注射利妥昔单克隆抗体联合全身应用甲基强地松龙治疗甲状腺相关性眼病(TAO)的临床效果。方法回顾性分析2017年3月至2019年4月就诊于我院的中、重度活动期TAO患者107例。入院后完善相关检查，并进行临床活动性(CAS)评分。给予全身甲基强地松龙静滴治疗，500 mg/周，共6周，后减量为250 mg/周，共6周；同时给予眼眶内注射利妥昔单克隆抗体注射液20 mg，1次/周，共8周。治疗期间及治疗后，详细记录CAS评分。随访3～25个月，平均13.2个月。结果完成全部疗程的患者共89例(男性45例，女性44例)，平均年龄34.7岁(17～76岁)。治疗前CAS平均7.4分(7～9分)；治疗第3周后平均CAS评分5.5分，有效率85%；治疗结束后，CAS评分平均2.9分，有效率90.3%。10%的患者在治疗结束后3个月内病情逐渐转为非活动期。其中3例(5只眼)行眶减压手术的患者，术后平均3.1个月病情复发，单独眶内注射利妥昔单克隆抗体8周，病情完全控制。55%的患者除首次注射后有轻度低热的不良反应外，其余患者均未见异常。随访至今，所有患者病情未见复发。结论利妥昔单克隆抗体抗局部注射联合全身应用甲基强地松龙更能提高中、重度TAO的治愈率，减少病情复发，甚至对眶减压术后复发的患者有良好的效果。

无人机蜂群作战特点和对抗体系设想下载：23 浏览：206

陈镜《无线电研究》 2020年12期

摘要:

近年来,无人机蜂群技术迅猛发展,正逐步演变为一种新型的作战样式,对传统的防空体系形成极大挑战。介绍了美国、俄罗斯等国家的无人机蜂群发展情况,对作战运用模式和特点进行了总结。提出无人机蜂群对抗的技术体系设想,对探测、跟踪和处置手段进行了分析,给出了无人机蜂群对抗的工作流程、发展阶段设想和效能评估要素。

甲状腺自身抗体水平检测对原发性甲减的诊断价值分析下载：54 浏览：290

柴改会《诊断医学》 2020年8期

摘要:

目的探求甲状腺自身抗体水平在原发性甲状腺功能减退中的诊断价值。方法选取收治的经临床确诊为甲状腺功能减退患者70例作为试验组,另选取同一时期体检的健康者70例作为对照组,采集两组受检者清晨空腹肘静脉血,采用放射免疫法检测甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAB)、抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平,采用酶联免疫法检测TSH受体抗体(TRAb)水平。比较两组TPOAB、TGAb、TRAb水平,并分析两组TPOAB、TGAb、TRAb阳性检出率。结果试验组TPOAB、TGAb、TRAb水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组TPOAB阳性检出率、TGAb阳性检出率、TRAb阳性检出率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床综合分析甲状腺自身抗体水平,有助于甲状腺疾病特征性及正确性的判断,为临床诊断原发性甲状腺功能减退提供重要参考依据。

铜绿假单胞菌黏附素蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备下载：71 浏览：473

宋静芳陈芬芳冯伟《生物技术研究》 2020年6期

摘要:

克隆铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)黏附素(adhesin)基因,表达纯化黏附素蛋白和获得多克隆抗体。[方法]设计特异性PCR引物,以铜绿假单胞菌DNA为模板,PCR法扩增铜绿假单胞菌黏附素基因,并将其进行双酶切后连接到表达载体pET28a,将重组质粒pET28a-adhesin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达,然后通过亲和层析进行纯化。再利用各种生物信息学软件分析该蛋白的生物学特性。将adhesin蛋白免疫小鼠,并获得了高浓度的多克隆抗体。[结果]显示成功得到了重组质粒pET28a-adhesin,并通过亲和层析得到重组adhesin蛋白。Adhesin的α-螺旋含量为46.37%,无规卷曲的含量为35.96%,β片层的含量为17.67%。模拟得到了adhesin蛋白的三级结构。该蛋白是一个跨膜蛋白,具有两个跨膜区。Adhesin蛋白具有良好的免疫原性,获得的抗血清效价高于1:5120。[结论]纯化得到了重组adhesin及其抗血清,为研究该蛋白的功能提供了实验基础。

Dhori病毒核蛋白基因的重组表达及其抗体制备下载：82 浏览：479

刘振明1 沈姝2 阿布力米提·莫明1 史深3 刘希佳2 丁军涛1 邓菲2 张渝疆3 孙素荣1 《生物技术研究》 2020年6期

摘要:

表达和纯化Dhori病毒(DHOV)核蛋白(NP),并制备多克隆抗体。[方法]RT-PCR扩增NP基因,并克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pcDNA3.1中。将重组质粒pET-28a-NP转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白NP(rNP)的表达并亲和层析纯化rNP,以抗DHOV阳性羊血清检测其抗原性,免疫新西兰兔制备抗血清,以ELISA法检测其效价。将pcDNA3.1-NP转染至Vero细胞,以间接免疫荧光法评估抗体的结合活性,Western Blotting检测抗体与重组蛋白的特异性反应能力。[结果]pET-28a-NP和pcDNA3.1-NP重组质粒构建正确,原核表达的rNP约为55.3 kDa,并能被阳性羊血清识别,制备的抗体效价为1:409 600,能特异性识别真核及原核表达产物。[结论]成功表达和纯化rNP,并制备了多克隆抗体,可用于深入研究DHOV核蛋白的生物学特性及其检测试剂。

人肺炎链球菌快速检测胶体金试纸的研制下载：86 浏览：479

李杰1 程雨洁1 宋慧茹1 任萌1 王毅1,2,3 杨波1,2,3 胡征1,2,3 《生物技术研究》 2020年1期

摘要:

研制一种快速检测人肺炎链球菌(S. pneumoniae)的免疫胶体金层析试纸。[方法]对肺炎链球菌表面蛋白A(pneumococcal surface protein A,PspA)基因序列(Gen Bank:U89711)作生物信息学分析,选取抗原表位强、种内同源性高的片段克隆表达纯化重组蛋白rPspA,并免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体;以双抗夹心法制备胶体金免疫层析试纸,并对其特异性、灵敏度以及稳定性进行验证分析。[结果]制备的胶体金试纸对rPspA最低检测限达到0. 1pg/m L,可在15min内完成对肺炎链球菌的检测,与其他10种重要呼吸道病原菌无交叉反应;试纸条在25℃条件下保存6个月仍具有良好的重复性和稳定性。[结论]PspA蛋白具有高度的表面暴露性和较强的抗原性,可作为Sp的检测标志物,以其抗体为基础制备的胶体金免疫层析试纸,适用于Sp菌感染的临床快速检测。

靶向EGFR二聚化界面单链抗体的构建及表达下载：81 浏览：487

李泽民赵林邓栩文祝贺邱创楠温碧燕刘梦苗李黄金《生物技术研究》 2019年6期

摘要:

构建靶向EGFR二聚化界面的单链抗体。[方法]构建单链抗体的基因并进行密码子优化,克隆于表达载体p GAPZα-A和毕赤酵母X-33。镍柱纯化目的蛋白,并对EGFR高表达细胞A431和EGFR正常表达细胞NIH-3T3进行体外抑制分析和抗磷酸化分析。[结果]纯化获得了分子量大小约29. 0 k Da的EGFR dimer Sc Fv蛋白。在48h体外抑制实验中,534 nmol/L EGFR dimer Sc Fv对A431和NIH-3T3的抑制率分别为34. 92±1. 30%和5. 89±0.46%,抑制作用与母本抗体相似。Western Blotting分析表明,EGFR dimer Sc Fv能显著抑制A431细胞EGFR磷酸化,而对NIH-3T3细胞显著无抑制作用。[结论]初步验证了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体作为新型抗体药物的可行性,为后续研究奠定了基础。

抗体检测技术在动物疫病防控中的应用下载：15 浏览：417

侯长娟《当代畜牧兽医》 2020年7期

摘要:

人与自然和谐相处的重要内容之一就是人与动物的和谐相处。在我国经济发展的过程中,畜牧业发展起着重要的作用,是国民经济的重要组成部分。但是,随着生态环境的恶化,动物疫病问题不断出现,同时表现出不同的特点,如疫病的严重性、病源的多样性和复杂性等,病原感染形式由单一感染转化为多重感染和并发感染的特点。一旦动物发生疫病,不仅危害动物的健康,同时也威胁到人类的安全。因此,对动物疫病进行防控和检疫工作非常重要。随着生态环境的恶化,病原感染形式由单一感染转化为多重感染和并发感染的特点,因此抗体检测技术的应用非常的重要。本文主要阐述了抗体检测技术在动物疫病防控工作中的具体应用。

尼罗罗非鱼ZAP-70蛋白的原核表达、纯化及其多抗制备下载：84 浏览：482

潘传燕1 冯鹏霏1 林勇1 罗洪林1张永德1 苏乾莲2 《生物技术研究》 2019年3期

摘要:

构建尼罗罗非鱼ZAP-70原核表达载体,纯化其重组蛋白并制备多克隆抗体。[方法]采用无缝克隆技术构建尼罗罗非鱼ZAP-70重组表达载体,并转入大肠杆菌B21中诱导表达,将表达的ZAP-70蛋白免疫日本大耳兔得到多克隆抗体,采用Western Blotting和ELISA技术鉴定抗体的特异性和效价。[结果]成功构建原核表达重组质粒p ET-B2m-ZAP-70,诱导表达的重组蛋白分子量约为39 k Da,主要以包涵体的形式表达;获得效价为1∶512 000的多克隆抗血清,WB检测显示该抗体能够特异性的识别所表达的ZAP-70重组蛋白。[结论]尼罗罗非鱼ZAP-70重组质粒在大肠杆菌B21中高效表达,分子量约为39 k Da,该蛋白具有良好的免疫原性,为进一步探索ZAP-70在尼罗罗非鱼免疫系统中的功能奠定了基础。

沙眼衣原体类噬菌体衣壳蛋白CtF的表达及多克隆抗体制备下载：67 浏览：496

王秋平1 李琪2 欧瑶琪2 朱冰玉2 周鹏2 陈丽丽2 柏琴琴2 《生物技术研究》 2018年12期

摘要:

预测沙眼衣原中类噬菌体衣壳蛋白CtF的空间结构,表达重组蛋白并制备多克隆抗体。[方法]采用SOPMA和I-TASSER等软件预测CtF的空间结构,利用MEGA6分析其系统发育关系;构建重组质粒pET-28a-CtF,转化至E.coli BL21(DE3)中进行克隆表达;纯化重组蛋白免疫ICR小鼠制备多克隆抗体。[结果]CtF蛋白包含八股β桶状核心结构和环形延伸结构,与已知的衣原体噬菌体VP1蛋白遗传距离较近;重组质粒表达相对分子量约为64 kDa的融合蛋白;免疫小鼠获得免疫血清效价达1∶12 800。[结论]CtF蛋白疑似为沙眼衣原体噬菌体的衣壳蛋白;重组质粒表达相对分子量约为64 kDa蛋白,该蛋白免疫原性良好,为进一步研究其功能奠定了基础。

小鼠Prune蛋白DHH结构域的原核表达及多克隆抗体的制备下载：75 浏览：490

陆翮1,2 高子昭1,2 康健1 许艳慧1 宁唤唤1 柏银兰1 《生物技术研究》 2018年10期

摘要:

表达、纯化小鼠Prune蛋白DHH结构域(m-Prune D),并制备多克隆抗体。[方法]生物信息学方法分析m-Prune D氨基酸序列;PCR扩增目的基因m-Prune D,克隆入原核表达载体p ET28a(+);IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白表达,亲和层析法纯化蛋白;用纯化的重组m-Prune D免疫小鼠制备多克隆抗体;Western Blot检测多克隆抗体特异性。[结果]PCR成功扩增m-Prune D基因,双酶切及测序结果表明成功构建m-Prune D原核表达载体,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表明成功表达约25 k Da的重组蛋白。纯化蛋白免疫小鼠后抗体滴度最高可达1∶25 600,所制备的多克隆抗体可特异性识别原核和真核细胞中DHH结构域蛋白。[结论]在E.coli中成功表达小鼠Prune蛋白DHH结构域,制备了多克隆抗体血清,可用于Prune蛋白生物学功能的进一步研究。

携带荧光素酶基因肝癌细胞株的构建及在肝癌原位移植瘤模型中应用下载：87 浏览：498

翟向明雷川梁芷冰李红卫杜红延《生物技术研究》 2018年2期

摘要:

构建稳定表达荧光素酶基因的人肝癌细胞株,建立可实时观察的肝癌原位移植瘤模型。[方法]构建含有萤光素酶基因的慢病毒载体,利用慢病毒三质粒系统磷酸钙共转染HEK 293T细胞,收集纯化病毒感染肝癌细胞SMMC7721,嘌呤霉素(puromycin)结合有限稀释法筛选稳定转导细胞株,将细胞原位注射裸鼠肝组织,建立原位肝癌动物模型。[结果]包装纯化的慢病毒悬液的滴度为8.4×106TU/m L,感染肝癌细胞后成功筛选到稳定表达的肝癌细胞株。利用该细胞株成功建立原位注射肝癌裸鼠模型,经活体荧光成像系统观察到肝癌细胞在活体动物体内的分布情况。[结论]荧光素酶肝癌细胞株的成功构建及利用该细胞株建立的原位移植瘤肝癌动物模型为肝癌的治疗研究奠定了基础。

代谢标记小分子探针6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成下载：34 浏览：369

韩小见1 温银行2 郑路2 赵康康2 苏峰1 马静3 王佳佳2 《化学研究前沿》 2020年3期

摘要:

以乙酰氨基半乳糖为起始原料,经过叔丁基二甲基硅基对糖环的6位选择性保护,随后将1,3,4进行甲氧甲基保护,选择性脱除6位保护基,经Dess-Martin氧化、Bestmann′s试剂和酸性条件下去保护后得到目标化合物,并通过单晶衍射确定了中间体7的结构；本文为6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成提供了有效的制备方法,为后续相关生物学研究提供了基础。

重组人源化抗PD-1单克隆抗体注射液Ⅰ期临床试验的综合护理对策下载：52 浏览：481

曾顺菲崔岩张望解文君刘荣佳《护理研究杂志》 2020年8期

摘要:

分析12例PD-1受试者的临床资料,结合国内外文献,分享和讨论临床试验工作中使用PD-1患者的护理经验与体会。

2014-2018年天津市南开区疑似麻疹病例血清学和病毒核酸检测结果分析下载：62 浏览：382

刘凤《预防医学杂志》 2020年10期

摘要:

目的对2014-2018年天津市南开区疑似麻疹病例的实验室检测结果进行分析,为麻疹的预防控制和早期诊断提供科学依据。方法采集疑似麻疹病例血清和咽拭子样本,分别采用ELISA法和Real-time RT-PCR法进行检测。结果共检测776例疑似麻疹病例,检出麻疹阳性428例,阳性率55.15%。2016年麻疹阳性率最高,为72.87%,高于其他年份(P<0.05)。麻疹的性别分布无差异;麻疹阳性率以<8月龄组最高,为78.57%,不同年龄组麻疹阳性率差异有统计学意义(P<0.001);麻疹多集中在1～5月份。出疹后0～3天采集的咽拭子核酸阳性率最高,为54.93%,高于其他组(P<0.05)。有明确麻疹免疫史的疑似麻疹病例麻疹阳性率低于无麻疹免疫史和免疫史不详的病例。ELISA法和Real-time RT-PCR法检测麻疹结果的差异无统计学意义(P=0.422)。结论继续做好麻疹常规免疫,开展重点人群的补充免疫工作;控制医院内感染,防止就医感染麻疹;保证样本质量,提高实验室确诊率。

2015-2017年云南省普洱市健康人群麻疹抗体水平监测分析下载：81 浏览：487

李永飞杨华董晋王海燕张锦张爱琪周晓冬《预防医学杂志》 2020年2期

摘要:

目的了解普洱市健康人群麻疹抗体水平,评价麻疹疫苗免疫效果,为制定麻疹防控措施提供科学依据。方法采取分层整群抽样方法,于2015-2017年对普洱市10 413名健康人群采集血清标本,采用ELISA方法对麻疹血清进行麻疹Ig G抗体检测。结果 2015-2017年普洱市健康人群麻疹抗体总阳性率为91.95%(9 575/10 413),麻疹抗体总保护率为60.15%(6 263/10 413),不同年份、地区、年龄、有无免疫史的人群麻疹抗体阳性率、保护率差异有统计学意义(P<0.001)。结论普洱市麻疹抗体水平阳性率处于较高水平,但麻疹抗体保护率偏低,麻疹抗体水平存在地区差异;加强麻疹抗体水平监测,及时发现免疫薄弱地区和空白人群是防治麻疹的关键。

三抗体夹心酶联试剂盒中南芥菜花叶病毒阳性对照替代物研制下载：51 浏览：482

赵世恒1 高润蕾2 张光3 李雪娇4 云晓鹏5 《农业学报》 2018年9期

摘要:

在研制的南芥菜花叶病毒三抗体夹心酶联(TAS-ELISA)检测试剂盒中,山羊抗鼠多克隆抗体能够起到很好的阳性对照作用,具有替代侵染性的南芥菜花叶病毒的功能,可以监控整个酶联反应体系是否正常工作,避免了检疫性南芥菜花叶病毒扩散到环境中去,通过分子生物学手段验证了研究的可行性。

中国人群传染性单核细胞增多症患者抗EB病毒抗体阳性检出率的Meta分析下载：86 浏览：515

张敏杰高玉芳杨飞飞徐晓莉《国际检验医学》 2020年11期

摘要:

目的采用Meta分析探讨抗EB病毒(EBV)抗体与中国人群传染性单核细胞增多症(IM)的关系。方法检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方科技期刊全文数据库、Pubmed、EMbase、中国生物医学文献检索数据库(CBM)和维普中文科技期刊全文数据库(VIP)中对IM患者和对照者血清抗EBV抗体进行检测的病例-对照研究，检索时限均为从建库至2018年2月。严格根据纳入和排除标准筛选文献，采用修改后的纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)进行质量评价。采用Rev Man 5.3软件计算每种抗EBV抗体血清阳性率的比值比(OR)，并对不同文献中各个抗体的OR值进行合并分析，采用敏感性分析来判断结果的稳定性，采用Egger检验评估纳入的研究是否存在发表偏移。结果共纳入16项研究，含1 305例IM患者和973例对照者。IM患者抗EB病毒衣壳抗原(EBV-VCA)IgM/IgG/IgA抗体、抗EB病毒早期抗原(EBEA)IgM/IgG抗体血清阳性率明显高于对照者，抗EBV-VCA IgM抗体总体OR=81.67，95%可信区间(CI)为57.88～115.22；抗EBV-VCA IgG抗体总体OR=7.86，95%CI为2.05～30.25；抗EBV-VCA IgA抗体总体OR=15.45，95%CI为1.13～211.81；抗EBEA IgM抗体总体OR=17.21，95%CI为7.76～38.15；抗EBEA IgG抗体总体OR=4.21，95%CI为1.08～16.40。IM患者血清抗EB病毒核心抗原(EBV-NA)IgG抗体阳性率与对照者比较，差异无统计学意义(OR=0.50，95%CI为0.08～3.00，P=0.45)。检测抗EBV-VCAIgG抗体的研究共纳入11项，各研究之间质量差别较大，异质性较大。亚组分析结果显示，各亚组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Egger检验结果显示无发表偏移。结论中国人群IM患者血清抗EBV-VCA抗体和抗EBEA抗体阳性率均明显高于对照者，而血清抗EBV-NA抗体阳性率则低于对照者。

北京市体检人群EB病毒联合抗体检测结果分析下载：81 浏览：521

张晗1 张超彦2 谢秋霞1 田建辉3 《国际检验医学》 2020年9期

摘要:

目的通过分析3项EB病毒（EBV）抗体联合检测结果，了解体检人群EB病毒感染情况，为鼻咽癌早期筛查提供技术支持。方法选取2017年1月1日—2018年6月30日在北京航天总医院健康管理中心进行EBV（Rta）-IgG、衣壳抗原（VCA）-IgA、早期抗原（EA）-IgA 3种抗体联合检测的体检人员共4 251名，采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果 4 251名受检者中3种EBV抗体单项阳性率的比较差异有统计学意义（χ2=12.465，P=0.000），阳性率由高至低的顺序依次为VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG；不同性别间VCA-IgA阳性率男性高于女性（P=0.000）；不同年龄组3种EBV抗体阳性率总体随年龄增长而增高，EA-IgA（P=0.000）及Rta-IgG（P=0.003 8）在不同年龄组中阳性率有显著差异，在61岁以上的受检者中EA-IgA和RtaIgG阳性率最高，分别为6.3%及3.7%，VCA-IgA在51岁以上的受检者中阳性率最高；92.9%的受检者3项检测均为阴性，1项阳性者占6.4%，2项阳性者占0.7%，未发现3项阳性者；抗体阳性检测结果男性与女性聚集情况比较无差别，抗体检出阳性受检者在耳鼻喉科检查发现鼻炎、鼻窦炎及其他异常比例较高。结论 3种EBV抗体的阳性率与性别和年龄都有一定的关系，50岁以上的人群应作为重点筛查对象。EBV抗体联合检测阳性受检者推荐鼻咽镜检查，为鼻咽癌的早期筛查提供依据。

北京市体检人群EB病毒联合抗体检测结果分析下载：76 浏览：492

张晗1 张超彦2 谢秋霞1 田建辉3 《国际检验医学》 2020年9期

摘要:

目的通过分析3项EB病毒（EBV）抗体联合检测结果，了解体检人群EB病毒感染情况，为鼻咽癌早期筛查提供技术支持。方法选取2017年1月1日—2018年6月30日在北京航天总医院健康管理中心进行EBV（Rta）-IgG、衣壳抗原（VCA）-IgA、早期抗原（EA）-IgA 3种抗体联合检测的体检人员共4 251名，采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果 4 251名受检者中3种EBV抗体单项阳性率的比较差异有统计学意义（χ2=12.465，P=0.000），阳性率由高至低的顺序依次为VCA-IgA、EA-IgA、Rta-IgG；不同性别间VCA-IgA阳性率男性高于女性（P=0.000）；不同年龄组3种EBV抗体阳性率总体随年龄增长而增高，EA-IgA（P=0.000）及Rta-IgG（P=0.003 8）在不同年龄组中阳性率有显著差异，在61岁以上的受检者中EA-IgA和RtaIgG阳性率最高，分别为6.3%及3.7%，VCA-IgA在51岁以上的受检者中阳性率最高；92.9%的受检者3项检测均为阴性，1项阳性者占6.4%，2项阳性者占0.7%，未发现3项阳性者；抗体阳性检测结果男性与女性聚集情况比较无差别，抗体检出阳性受检者在耳鼻喉科检查发现鼻炎、鼻窦炎及其他异常比例较高。结论 3种EBV抗体的阳性率与性别和年龄都有一定的关系，50岁以上的人群应作为重点筛查对象。EBV抗体联合检测阳性受检者推荐鼻咽镜检查，为鼻咽癌的早期筛查提供依据。

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