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NDV-HN致人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究 下载：73 浏览：440

田雯钰 林宇宁 梁莹 黄娟娟 李瑞 樊晓晖 《肿瘤研究》 2020年6期

摘要:
[目的]探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。[方法](1)构建包含绿色荧光素蛋白(GFP)及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体，用293V细胞包装慢病毒LvsfGFP-HN，用293V细胞进行空载质粒转染组(空载组)慢病毒包装，命名为Lv-sfGFP；(2)以空载组A549-sfGFP细胞和空白组A549为对照，用慢病毒转染方法建立稳定表达NDV-HN蛋白的A549细胞株，即A549-sfGFP-HN细胞株，RT-PCR、Western blot检测A549细胞NDVHN蛋白的表达；(3)分别在A549-sfGFP-HN和A549两组细胞中加入顺铂，流式细胞术检测细胞凋亡；(4)在基因水平和蛋白水平上分别用RT-PCR和Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。[结果](1)Lv-sfGFP-HN和Lv-sfGFP慢病毒分别转染A549细胞后，只在转染组A549-sfGFP-HN细胞检测到NDV-HN蛋白。(2)转染组A549-sfGFP-HN细胞凋亡率明显高于空白组A549细胞(P<0.01)，转染组A549-sfGFP-HN细胞加入顺铂后，其细胞凋亡率明显增加。(3)转染组A549-sfGFP-HN细胞与空载质粒转染组A549细胞和空白组A549细胞相比，凋亡相关蛋白Bcl-2表达量明显下调(P<0.01)。[结论]慢病毒转染NDV-HN到A549细胞后导致A549-sfGFP-HN细胞出现凋亡，且与Bcl-2下调有关。转染NDV-HN的肺癌细胞联合使用抗癌药物顺铂，增加了肺癌细胞凋亡率。

二甲双胍对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力及乳酸生成的影响 下载：66 浏览：360

谢建将 陈敏东 陈曲海 梁登峰 徐子迅 吕德雄 白文杰 《肿瘤研究》 2018年12期

摘要:
[目的]探讨二甲双胍对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭能力、乳酸生成的影响。[方法]应用Annexin V/PI和API等标记，流式细胞仪对肺癌A549细胞凋亡及周期特异性的检测，运用RT-PCR的方法检测Caspase-3、Caspase-9活化情况。MTT检测细胞增殖活力；Transwell体外迁移实验检测细胞体外迁移和侵袭能力；并检测乳酸生成情况。[结果 ]二甲双胍诱导的细胞凋亡主要在细胞周期的G1期发生。采用二甲双胍凋亡诱导，对照组未做处理，结果显示观察组的Caspase-3 m RNA(1.12±0.56)、Caspase-9 m RNA(1.10±0.29)的表达值显著高于对照组(0.82±0.31，0.72±0.26)。Transwell结果显示，第7d二甲双胍组体外迁移细胞数(2.69±0.56)明显增加；二甲双胍组细胞活力(52.39%±5.96%)下降；二甲双胍组乳酸生成(12.89±1.03)明显降低。[结论 ]二甲双胍诱导的细胞凋亡与肺癌A549细胞的细胞周期相关，存在G1期细胞周期阻滞的周期特异性，且此过程中发生了caspase活化，抑制细胞活性及迁移侵袭能力，降低乳酸的生成，促进肿瘤细胞凋亡。

谷氨酰胺对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及TNF-α和NF-κB表达的影响 下载：36 浏览：343

赖彦1 邓述恺2 《肿瘤研究》 2018年9期

摘要:
[目的]探讨谷氨酰胺(glutamine，Gln)对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及TNF-α、NF-κB表达的影响。[方法]体外培养肺腺癌A549细胞株，CCK-8法检测不同浓度Gln(2、4、8、16、32、64mmol/L)对A549细胞的增殖影响，筛选适宜浓度。Transwell实验检测细胞迁移能力，ELISA法和Western Bolt法分别检测TNF-α、NF-κB p65蛋白表达。[结果 ](1)Gln对A549细胞的作用与干预浓度有关，缺乏Gln时细胞生长受限；低浓度Gln(2、4、8mmol/L)对细胞增殖无明显抑制作用；高浓度Gln(16、32、64mmol/L)作用下抑制作用明显(P<0.01)并呈时间依赖性，且32mmol/L和64mmol/L两组作用无明显差异(P>0.05)。(2)与对照组相比，Gln组明显降低A549细胞迁移数；高浓度Gln组明显降低TNF-α、NF-κB p65蛋白的表达(P<0.01)，但32mmol/L和64mmol/L组之间无统计学差异(TNF-α分别为14.671±0.842pg/ml、14.867±1.21pg/ml，NF-κB p65分别为0.548±0.042、0.474±0.077)(P>0.05)。[结论 ]Gln对肺腺癌A549细胞的作用与浓度有关，32mmol/L可能为最适抑制浓度。Gln可能通过下调TNF-α和NF-κB p65蛋白表达并抑制A549细胞的迁移发挥抗肺腺癌作用。

RGS16基因抑制肺癌发病进展的功能研究 下载：73 浏览：482

唐松云1 谢伟全1,2 《生物技术研究》 2020年1期

摘要:
研究RGS16基因对人肺癌发病及进展的作用。[方法]构建过表达慢病毒载体Lenti-RGS16,感染A549细胞,以CCK-8实验、平板克隆形成实验、划痕实验、FITC/PI染色法检测A549细胞行为包括增殖、克隆形成、迁移、凋亡率变化,以裸鼠成瘤实验检测A549细胞体内生长。[结果]A549细胞中RGS16基因表达量提高3. 6倍,细胞生长、增殖及迁移能力分别降低73%、62. 8%、88%,细胞凋亡率增加3倍;在动物成瘤实验终点时,RGS16过表达组的肿瘤体积比对照组显著减少(240 vs 1090 mm3),瘤体重量也显著降低(0. 33 vs 0. 95 g)。经分析TCGA数据库发现RGS16基因在肺癌组织中表达比正常对照组织中减少52. 8%。[结论] RGS16基因抑制肺癌A549细胞生长、增殖及迁移,促进细胞凋亡。

补中益气汤含药血清诱导A549细胞自噬性死亡的研究 下载：92 浏览：526

陈雨诗 刘春英 王淳 《中国中医药》 2019年10期

摘要:
目的:研究补中益气汤含药血清诱导人肺腺癌A549细胞自噬性死亡并探讨其分子机制。方法:利用血清药理学方法制备含药血清，并干预A549细胞，分别应用光学显微镜观察细胞生长状况、MTT法检测细胞增殖情况、电子显微镜观察凋亡小体、蛋白质免疫印迹方法检测自噬相关蛋白的表达水平。结果:补中益气汤含药血清能抑制A549细胞增殖并诱导A549细胞发生自噬性死亡。结论:补中益气汤含药血清可诱导A549细胞发生自噬性死亡。
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